Thrombin Sepharose Beads
产品介绍
亮点配方:6%交联琼脂糖珠提供50%的纯甘油浆液。
配体密度:1mg/ml树脂。
应用:高效、方便地切割含有凝血酶特异性裂解位点的重组融合蛋白。
方案:为了找到一个目标融合蛋白的最佳切割条件,建议在小范围内进行初步的切割反应。凝血酶的成功裂解依赖于融合蛋白的正确折叠,使酶能够进入凝血酶识别序列。一旦获得了最佳的切割条件,反应就可以放大,以裂解全部的目标融合蛋白。靶融合蛋白应纯化至均匀,并在50 mM Tris缓冲液、0.1 M NaCl、pH 8.0下透析,然后开始裂解反应。
1) 轻轻地旋转着珠子。不要涡流。
2) 等分15µl悬浮液,并将其添加到1 mg Eppendorf管中的融合蛋白中。靶融合蛋白的推荐浓度为1mg/ml。
3) 倒置试管轻轻混合(不要漩涡),并在室温下在旋转摇床上轻轻摇动。
4) 以固定的时间间隔旋转试管,将试样等分并立即冷冻。反应结束后,用SDS-PAGE分析样品。
裂解目标蛋白的回收:
1) 在融合蛋白完全裂解后,以5000转/分的速度旋转反应混合物2-3分钟。
2) 去除上清液,用0.2 ml 50 mM Tris缓冲液(pH 8)清洗珠子。
3) 重复步骤1和2以最大限度地回收目标蛋白及其裂解片段。进一步的层析可能需要从目标蛋白中去除裂解片段。
储存条件-20°C
装运条件凝胶包
仅供研究使用!不用于人类。
参数信息 | |
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外观状态: | 固体或粉末 |
质量指标: | 95%+ |
溶解条件: | 有机溶剂/水 |
CAS号: | N/A |
分子量: | N/A |
储存条件: | -20℃避光保存 |
储存时间: | 1年 |
运输条件: | 室温2周 |
生产厂家: | 上海金畔生物科技有限公司 |