赖氨酸48突变为胱氨酸使泛素（Ub）不能通过赖氨酸48与其他Ub分子的连接形成多Ub链。ubk48c可在C端形成E1催化的活性硫酯，允许分子转移到底物蛋白质的赖氨酸（单泛素化）。对于减少聚-Ub链长度/共轭速率和确定多-Ub链是否为K48连接的理想选择。