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1. Bioporto品牌介绍
肾功能损伤早期诊断试剂盒和抗原、抗体(抗体品牌为Antibodyshop),包括早期肾衰竭ELISA试剂盒NGAL(FDA认可)、MBL 、Gc-globulin、ELISA Kit。
2. Bioporto重点产品
肾功能损伤早期诊断试剂盒和抗原、抗体
3. Bioporto官网
http://www.bioporto.com
4. 金畔生物代理Bioporto品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
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1. BioVendor品牌介绍
BioVendor 是欧洲的一家医药科技公司,专注于为分子和细胞学实验室提供体外研究产品,主要产品有重组蛋白、抗体和 ELISA 试剂盒。目前公司致力于有关激素和细胞活素利用方面的研究
,产品相关方向:能量代谢和体重调节、骨代谢、心血管疾病和肾病、感染和发炎、铁代谢研究、肌肉生长控制、神经组织损坏标记、肿瘤学、胰腺调节分子、分泌型磷脂酶 A2等。
2. BioVendor重点产品
重组蛋白、抗体和 ELISA 试剂盒
3. BioVendor官网
http://www.biovendor.com
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Bio-rad品牌代理商–上海金畔
1. Bio-rad品牌介绍
美国伯乐BIO-RAD公司公司总部设在美国加里福尼亚州的Hercules,在全球有30多家全资子公司,服务于全球超过85,000家科研院所,生物技术和制药公司,和临床实验室。
BIO-RAD公司自1952年成立以来,在50多年中为临床诊断和生命科学研究市场提供了广泛的新型产品和服务,始终居于科学发现的中心地位。 BIO-RAD公司 现今利用多种技术制造并
生产了几千种产品,这些技术包括蛋白质组学、生物信息学、电泳、成像、免疫测定、层析、微生物学和基因转移。根据产品的不同,BIO-RAD公司公司下设三大部门,它们是生命科学部,临
床诊断部和工业材料部,产品种类达6000余种。BIO-RAD公司主要产品有蛋白组研究产品、层析仪与填料、蛋白质和核酸电泳产品、基因枪与电穿孔仪、定量基因扩增仪、图像分析系统、激光
共聚焦扫描显微镜、酶标仪和洗板机系列、食品检测仪器与试剂、糖化血红蛋白检测系列产品、质控系统、毒物检测产品、血液病毒检测产品等。
2. Bio-rad重点产品
生命科学试剂
临床诊断试剂
3. Bio-rad官网
www.bio-rad.com
4. 金畔生物代理Bio-rad品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
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订货热线:15221999938
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Avanti品牌代理商

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1. Avanti品牌介绍
Avanti磷脂—世界实验室磷脂知名品牌
Avanti —–优质的脂质产品 丰富的产品种类,将为您的实验保驾护航
Avanti Polar Lipids Inc.享誉全球的磷脂类和甾体类中间体和试剂生产商,在磷脂类和甾体类的研发与生产方面具有国际一流实力,它为各地的制药厂及研究机构提供1000种以上的磷脂类产品。其产品的高纯度为客户提供了有质量保证的产品,该公司能提供从毫克级到公斤级乃至吨级的磷脂类和甾体类中间体和试剂。该公司将为广大中国用户提供:齐全的品种种类、各种不同的包装规格、高品质的磷脂产品、专业的技术支持、人性化的服务。
2. Avanti重点产品
磷脂产品种类:
1   Natural Lipids——天然脂质
2   Sphingolipids   ——鞘脂类
3   Phospholipids——磷脂
4   Sterols——固醇
5   Bioactive Lipids    生物活性脂质
6   Neutral Lipids  中性脂肪
7   Detergents  去污剂 等等
8   Fluorescent Lipids  荧光脂质
9   Cationic Lipids (Transfection)  阳离子脂质
10  Coenzyme A & Derivatives    辅酶A:及衍生物
11  Fatty Acid Modified Lipids  脂肪酸改性脂质
12  Headgroup Modified Lipids   头基改性脂质
13  Stable Isotopes & ESR Probes 同位素及ESR探头
14  Polymers & Polymerizable Lipids脂类聚合物
3. Avanti官网
www.avantilipids.com
4. Avanti重点产品清单
Avanti磷脂产品种类:
1   Natural Lipids——天然脂质
2   Sphingolipids   ——鞘脂类
3   Phospholipids——磷脂
4   Sterols——固醇
5   Bioactive Lipids    生物活性脂质
6   Neutral Lipids  中性脂肪
7   Detergents  去污剂 等等
8   Fluorescent Lipids  荧光脂质
9   Cationic Lipids (Transfection)  阳离子脂质
10  Coenzyme A & Derivatives    辅酶A:及衍生物
11  Fatty Acid Modified Lipids  脂肪酸改性脂质
12  Headgroup Modified Lipids   头基改性脂质
13  Stable Isotopes & ESR Probes 同位素及ESR探头
14  Polymers & Polymerizable Lipids脂类聚合物
及设备  Mini-Extruder,Packaging Container等。
Lyso PC 溶源性卵磷脂
Lyso PA 溶源性磷脂酸
Lyso PA Analogues 溶源性磷脂酸类似物
Lyso bio-PA溶源性双磷脂酸
Lyso PE, PG & PS 溶源性脑磷脂,磷脂酰甘油和磷脂酰丝氨酸
Alkyl PC 烷基卵磷脂
Diether & Diphytanoyl ether lipids 二醚与二植烷醚脂质
PAF 血小板活化因子
Acyl PAF Analog 酰化血小板活化因子类似物
Brominated phosphocholines 溴代胆碱磷酸
Alkyl phosphate derivatives 烷基磷酸盐衍生物
Plasmalogen 缩醛磷脂
Functionalized lipids 功能性脂类
Biotinylated lipids 生物素酰化脂质
Synthetic phospholipids 合成磷酸
Avanti磷脂产品试剂报价:
该类产品的的包装从10mg-1g不等的包装,其中存在三种状态,氯仿状,乙醇状和粉末状,所以报价也各不相同,最小包装的产品报价范围是300-2000元不等。最大包装的报价范围是2000-30000元不等。具体报价需咨询上海生物科技有限公司工作人员。
Avanti磷脂品质性能参数
Avanti磷脂的保存环境是零下-20°保存,其产品的保质期各不相同有的保质期是2年有的保质期是1年还有的保质期是6个月。产品的纯度均大于99%。
5 金畔生物代理Avanti品牌联系方式
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多酚氧化酶(PPO)的分离提取 DEAE-纤维素DE 52

实验一 多酚氧化酶(PPO)的分离提取 DEAE-纤维素DE 52

一、原理与目的
多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶,植物受到机械损伤和病菌侵染后,PPO催化酚与O2氧化形成醌,是组织形成褐变,以便损伤恢复,防止或减少感染,提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用,所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应,因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联,起到末端氧化酶的作用。
PPO的存在是水果、蔬菜褐变及营养丧失的主要原因之一。PPO氧化内源的酚类物质生成邻醌,邻醌再相互聚合成醌或蛋白质、氨基酸等作用生成高分子络合物而导致褐色素的生成,色素分子量愈高,颜色愈暗。多酚氧化酶活性高低也是马铃薯解除休眠的指标之一。
本实验将采用马铃薯为主要材料,通过组织细胞破碎匀浆、过滤、离心、硫酸铵沉淀、透析等步骤获得PPO的粗酶液。
通过本项实验,学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法,掌握相关仪器设备的操作使用,以及蛋白质的提取、分离的系统技术。
二、材料与试剂
(1)马铃薯(大约每小组100-200g)
(2)试剂:
0.03M磷酸缓冲液PH6.0(内含0.02M巯基乙醇,0.001MEDTA,5%甘油,1%的聚乙烯吡咯烷酮)配制时配×10倍的浓缩液1000ml;固体硫酸铵;0.03M磷酸缓冲液PH6.0(内含0.02M巯基乙醇,0.001MEDTA,0.005MgCL2)配置时配
(3)实验器械与仪器设备:
试管与试管架;烧杯、玻璃搅棒;移液管、滴管等;试剂瓶;透析袋;
过滤纱布;植物组织匀浆器;pH计和pH试纸;GL-20C高速冷冻离心机;
DL-7A大容量低速冷冻离心机
三、操作步骤
1:粗酶提取:
水果肉组织按1:1(W/V)比例与003M磷酸缓冲液PH6.0(内含0.02M巯基乙醇,0.001MEDTA,5%甘油,1%聚乙烯吡咯烷酮)混合,匀浆4层后纱布过滤,滤液以6000rpm离心10min,弃除沉淀获得酶提取液。
2:盐析分级沉淀:
在酶提取液中加入固体硫酸铵使其达到40%饱和度(边加边搅拌达到充分溶解),然后6000rpm离心20min弃除沉淀;离心上清液在加入固体硫酸铵达到70%饱和度(边加边搅拌达到充分溶解),再以6000rpm离心20min,弃除上清夜,收集粗酶沉淀。
四、实验结果
获得PPO粗酶液。
实验二 PPO粗酶液的纯化
一、原理
1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)
2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素DE52柱材料,因为PPO是带有阳离子的蛋白质,在层析时会吸附在柱材料上,而杂蛋白会洗下。后用NaCl梯度洗脱PPO,(NaCl为强离子交换剂,能将弱吸附在柱材料上的PPO置换下来)。粗酶液从而得到纯化。
二、材料与试剂
试剂:0.02M Tris-HCL缓冲液Ph7.4(内含0.001M EDTA)配制时配×10倍浓缩液1000ml;NaCL;聚已二醇;DEAE-纤维素DE52;葡聚糖凝胶Sephadex G-200;兰葡萄糖-40、70、100等;
实验器械与仪器设备:试管与试管架、烧杯、玻璃搅棒、移液管、滴管等;试剂瓶、层析柱、pH计和pH试纸、恒流泵、梯度混合仪、核酸蛋白监测仪、GL-20C高速冷冻离心机、DL-7A大容量低速冷冻离心机
三、操作步骤
1.葡聚糖凝胶的处理、装柱及平衡
(1)柱材处理
称取一定量的Sephadex G-200干粉,加无离子水或蒸馏水浸泡溶胀48h,去掉悬浮的细微颗粒,为防止凝胶颗粒中的空气存在,影响层析效果,凝胶装柱前一定要将凝胶液中的气体除掉,其办法是将凝胶液放进抽滤瓶中,进行抽真空处理,直到凝胶液中没有气泡出现为止。
(2)装柱
将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上,加1/3体积的无离子水,打开下出液口,水流畅通,即刻将小烧杯中装有适宜浓度的凝胶液(凝胶的浓度过高会产生气泡,影响蛋白质分离速度,浓度过低易产生凝胶分层,影响蛋白质的分离效果)轻轻倒入层析柱中,凝胶自然慢慢沉降在层析柱底部,凝胶沉积直到离层析柱上端1.5-2cm处,停止装柱,剪一与柱内径相等的滤纸片覆盖于凝胶上。层析柱上端进液口连接恒流泵,下出液口连接蛋白质监测仪,待层析柱的平衡。
(3)平衡
在柱层析上样前必须对层析柱进行平衡,所谓平衡就是将层析柱中的溶液用层析过程的缓冲液(洗脱液)置换出来,使层析柱中的缓冲系统与柱层析过程中的系统一致。其方法是:利用层析柱上端的恒流泵将平衡缓冲液泵入到层析柱内,打开层析柱下端的出口,平衡液流速在0.5-1ml/min,当下出口流出液的PH值与平衡缓冲液的PH值一致时,层析柱达到了平衡。在本实验中,用0.002M Tris-HCL缓冲液PH7.4(内含0.0001M EDTA),平衡Sephadex G-200凝胶。
2.上样:将粗酶液上柱。
3.洗脱:用0.02M Tris-HCL缓冲液Ph7.4(内含0.001M EDTA)洗脱,收集洗脱液进行酶活性、蛋白质浓度、聚丙烯酰胺凝胶电泳分子量的基本性质分析测定。
4.DEAE-纤维素的处理及装柱
(1)处理
本实验采用的是DEAE-纤维素DE 52 是弱酸型阴离子交换剂,具体处理方法为:先将DE52阴离子交换剂干粉浸泡于蒸馏水中,去除杂质;再在0.5N的HCL溶液中浸泡1-2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上,并将其在抽滤漏斗中抽干;将抽干的离子交换剂浸泡在0.5N的NaOH溶液中1-2h,再用无离子水或蒸馏水将其洗至中性。
(2)装柱
将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上,加1/3体积的无离子水,打开下出液口,水流畅通,即刻将小烧杯中装有适宜浓度的柱材,轻轻倒入层析柱中,凝胶自然慢慢沉降再层析柱底部,凝胶沉积直到离层析柱上端1.5-2cm处,停止装柱。层析柱上端进液口连接恒流泵,下出口连接蛋白质监测仪,待层析柱的平衡。
(3)平衡
在柱层析上样前必须对层析柱进行平衡,所谓平衡就是将层析柱中的溶液用层析过程的缓冲液(洗脱液)置换出来,使层析柱中的缓冲系统与柱层析过程中的系统一致。其方法是:利用层析柱上端的恒流泵将平衡缓冲液泵入到层析柱内,打开层析柱下端的出口,平衡液流速在0.5-1ml/min,当下出口流出液的PH值与平衡缓冲液的PH值一致时,层析柱达到了平衡。在本实验中,用0.002M Tris-HCL缓冲液PH7.4(内含0.0001M EDTA),预先将DE-52柱进行平衡。
5.上样:
将洗脱酶液上样,用0.02M Tris-HCL缓冲液pH7.4(内含0.001M EDTA)洗脱杂蛋白。
6.洗脱:
用含NaCL(0.2-0.6M)的0.02M Tris-HCL缓冲液pH7.4(内含0.001M EDTA)进行梯度洗脱。
7.测定酶活性和蛋白质浓度
实验三 PPO活性测定
一、原理与方法
PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。
其方法是:在含有4mlPH5.8的0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液试管中加入0.05ml0.05M邻苯二酚溶液,在30℃恒温水浴中预热后加入0.05ml酶液,反应5分钟,在分光光度计410nm处读取吸光值。在上述条件下,以A410读数,以每分钟增加0.01O.D.值定义为一个酶活性单位(U)。
二、仪器与试剂
(1)样品:
多酚氧化酶粗酶液
硫酸铵沉淀组分
DE-52洗脱组分
葡聚糖凝胶洗脱组分
(2)底物:
邻苯二酚:O.01M邻苯二酚溶液
(3)反应体系:
0.2M邻酸二氢钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8
(4)器皿与仪器:
试管、恒温水浴等
分光光度计
三、酶蛋白的比活性
比活性=酶活单位(U)/mg蛋白质
四、实验结果与分析
1. Sephadex G-200的洗脱组分的相对浓度(OD590)和相对酶活(OD410)
结果列表
试管号 蛋白质浓度 PPO酶活 试管号 蛋白质浓度 PPO酶活
空白 0 0 3 0.16 0.09
粗酶液 0.20 0.14 4 0.03 0.03
1 0.00 0.01 5 0.03 0.01
2 0.13 0.09 6 0.02 0.02
分析:2和3试管中含绝大部分所需蛋白,保存进行下一步纯化。
2. DE-52的洗脱组分的相对浓度(OD590)和相对酶活(OD410)
结果列表
试管号 蛋白质浓度 PPO酶活 试管号 蛋白质浓度 PPO酶活
空白 0 0 3 0.03 0.05
粗酶液 0.22 0.16 4 0.09 0.05
1 0.00 0.00 5 0.07 0.02
2 0.03 0.02 6 0.03 0.00
分析:酶活性高低不一定与蛋白含量高低成正比,3和4试管中含较多所需蛋白。
实验四 胰酶分离提取
一、原理与目的
提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。
胰酶在PH3.0时最稳定,可在低温下储存较长的时间而不失活;低与此PH酶易变性;高于PH5时,酶易自溶而失活。因此提取制备胰酶的全部操作过程应在低温和低PH下进行。胰酶以无活性的酶原形式存在于动物的胰脏中。胰蛋白酶原在正常生理条件下可被肠激酶和钙离子所激活或自我环化成为有活性的酶。猪胰蛋白酶原分子量约24000-25000,而猪胰酶分子量为23400。在酶原活化的过程中,酶原N端Lys与Ile之间的 一个肽链被断裂,丢失一个6肽,分子构象发生改变,PI变成10.8。
本实验拟通过从猪胰脏中制备胰酶结晶实验,掌握酶的制备、一般分离、提取、纯化和结晶的操作技术。同时为亲和层析、免疫学实验准备实验样品。
二、材料与试剂
1.仪器
紫外光分光光度计、恒温水浴、离心机、组织捣碎机、PH计、显微镜、秒表、剪刀、镊子、搪瓷盆、乳钵、大玻璃漏斗、抽滤瓶,塑料小桶、纱布、PH试纸,滤纸、玻璃器皿等。
2.材料:新鲜猪胰脏
3.试剂及溶液配制
pH2.5乙酸酸化水、2.5M H2SO4溶液、2M.NaOH溶液、5M NaOH溶液、01M HCL溶液、0.025M HCL溶液、0.01M HCL溶液、0.4M pH9.0硼酸缓冲液(母液为0.8M,用时稀释一倍)、Tris、硫酸铵。
0.8M pH9.0硼酸缓冲液:取20ml0.8M四硼酸钠溶液,混合后用PH计校正。
三、操作步骤
1.胰蛋白酶原的提取与分离:
(1)称取1-1.5Kg新鲜猪胰脏,在冰浴下剥除脂肪和结缔组织,在低温下用绞肉机绞碎胰脏(或用高速组织匀浆机捣碎)加1-2倍体积以预冷却的PH2.5-3.0乙酸酸化水溶液提取(按1g组织相当于1ml体积计算,以此类推)。检查提取液中PH,若高于PH3.0时应及时用10%乙酸调节,使提取液维持PH2.5-3.0之间。在冷室5℃左右搅拌提取18-24h,而后用4层纱布过滤,尽量拧挤出滤液,滤液呈乳白色,用约300mlpH2.5乙酸酸化水再提取残渣一次(时间约为1-2h),合并滤液,此时滤液PH值较高,可用5M H2PO4溶液调整PH至2.5-3.0,放置 3-5h后,浑浊滤液冷却后,用玻璃漏斗进行自然过滤,滤液呈黄色透明液体,收集滤液,量其总体积,弃去沉淀物。
(2)盐析:滤液加固体粉状硫酸铵进行盐析,使溶液至75%饱和度。盐析溶液放冷室中过夜,次日用4000r/min离心机离心,或用布氏漏斗抽滤,滤饼经压干后称重,可得约20g胰蛋白酶原粗制品。
(3)胰蛋白酶原得激活:将胰蛋白酶原粗制品用10倍体积得冷蒸馏水,分多次加入使滤饼溶解,溶液呈乳白色,量其体积,取出1ml溶液用于测定,溶液中硫酸铵得含量(约为滤饼重得1/4)。因为硫酸铵可以与活化剂钙离子结合,生成硫酸钙,如果钙离子过少会直接影响胰酶原的激活过程,按浓度量计算,将已研细的固体CaCL2慢慢加入酶原溶液中,边加边搅拌均匀。用5MNaOH溶液调PH至8.0。在酶溶液加入约5mg结晶猪胰蛋白酶,轻轻搅拌均匀,置5℃冰箱中使酶原活化。
(4)纯化:去除杂蛋白,量取胰蛋白酶溶液体积后,用5M硫酸溶液调节滤液PH至2.5-3.0,抽滤除去硫酸钙沉淀,滤液体积约1000ml,加入已经研细的硫酸铵粉末,使其溶液达40%饱和度(每升滤液加242g硫酸铵)。放置5℃冰箱中5-8h,抽滤除去沉淀。
实验五 卵清蛋白分离提取
一、实验目的与原理
鸡卵粘蛋白存在于鸡蛋清中,对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,高纯度的鸡卵粘蛋白抑制胰蛋白酶的分子酶的分子比为1:1。鸡卵粘蛋白在中性或酸性溶液中对热和高浓度的脲都是相当稳定的,而在碱性溶液中较不稳定。
由于鸡卵粘蛋白对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,因此可以用鸡卵粘蛋白做亲和配基配制纯化胰酶的亲和材料。
二、材料与试剂:
1.材料:新鲜鸡蛋2只
2:仪器:抽滤瓶500-1000ml、烧结漏斗、移液器、磁力搅拌器
3:试剂:
10%TCA,用固体NaOH调调PH至1.05-1.10,需要50ml、5N HCL、5N NaOH、冷丙酮、胰蛋白酶液、BAEE-0.05M,PH8.0Tris-HCL缓冲液(每ml含0.34BAEE和2.22mgCaCL2),50ml
pH8.0,0.1M Tris-HCL缓冲液
三、操作步骤
1,取两只新鲜鸡蛋,得蛋清50ml,置于烧杯中,外用温水浴25℃-30℃,在不断搅拌条件下,缓慢加入等体积得三氯乙酸-丙酮(1:2V/V),立即出现大量白色絮状沉淀,加完后最终PH约3.5,再继续搅拌30min,然后在4℃冰箱中放置过夜。
2,次日用布氏漏斗抽滤,得黄绿色清液。
3,边搅拌边加入4℃预冷的丙酮200ml沉淀蛋白,在4℃放置2h之后将上清液小心倒入瓶中回收,下部沉淀部分于4000rpm离心5min,收集沉淀。
4,将沉淀溶于10ml无离子水中,对无离子水(50倍)透析4h,换水两次,再对碳酸钠缓冲液透析过夜,4000rpm离心10min ,去除不溶物。
实验六 亲和层析纯化胰酶
一、实验目的与原理
生物大分子化合物的重要特征之一是具有与某些相对应的分子通过次级键或共价键专一结合的能力即亲和力。例如酶与抑制剂之间,抗原与抗体之间,结合的双方不仅是专一的,而且结合以后可以在不丧失生物活性的基础上用物理或化学的方法进行解离。根据这一特性,如果把具有亲和力的一对分子的某一方连接于水不溶的固体载体上作为固定相,那么另一方随着流动相流经该固定相的时候,双方便亲和结合为一个整体。然后只有改变某种物理条件或化学条件使结合的双方解离,即能得到于固定相有特异亲和力的某一特定物质。这种利用生物分子和相对应分子之间亲和结合和解离性质而建立起来的层析方法称之为亲和层析。
本实验通过将胰蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)(protease inhibitor)(protease inhibitor)-鸡卵粘蛋白与Sephadex-G75偶联及亲和层析纯化胰酶的操作,以了解亲和层析的基本原理,掌握亲和柱材活化偶联及亲和层析操作的基本过程和技术。
二、仪器与试剂
1.鸡卵粘蛋白制备
2.Sephadex-G75的活化和偶联
2.5g干重的葡聚糖凝胶Sephadex-G75 、0.05M NaCL溶液 50ml、纯化的鸡卵粘蛋白87.5mg、 5% K2CO3、0.27gKBH4 (溶于20ml水)
3.亲和层析
0.1M Tris-HCL pH7.5(含0.5M KCL,0.05M CaCL2) 200ml、粗胰蛋白酶约50ml 、0.1N甲酸钾、0.5M KCL pH2.5 100ml
仪器器材:抽滤瓶500-1000ml、层析柱、紫外分光光度计、紫外蛋白检测仪、烧杯漏斗、移液管、磁力搅拌器
三、操作步骤
1、鸡卵粘蛋白的制备
2、Sephadex-G75的活化及偶联
2.5g干重的葡聚糖凝胶Sephadex-G75溶胀洗涤数次,缓慢搅拌,加入0.05M NaCL溶液50ml ,30min,蒸馏水洗涤数次,抽干备用,活化凝胶,纯化的鸡卵粘蛋白87.5mg 溶于35ml水,加入活化葡聚糖凝胶,75%K2CO3,调pH7.5-9.0,缓慢搅拌3h。反应过程随时加入5%K2CO3,以维持pH的稳定。0.27gKBH4 溶于20ml水,缓慢搅拌加入上述体系反应5h,pH维持在6.5-7.5,洗涤。
3、胰蛋白酶的亲和层析
卵类粘蛋白在pH7-8的条件下能与胰蛋白酶专一地结合,而在pH2-3时又能解离,因而掌握好上柱地PH条件和洗脱缓冲条件,便可将胰蛋白酶从含杂蛋白地粗酶液中选择性地结合于柱上,待洗去不结合或非专一性结合地杂蛋白后,改变PH值便可将胰蛋白酶洗脱下来。从而达到纯化地目的。由于亲和层析结合地专一性,上柱体积可以比较大,得到浓缩的提纯产品。
(1)亲和层析
将鸡卵粘蛋白-Sephadex-G75装柱(1×10cm),用pH7.5,0.1M含 0.5M KCL,0.05M CaCL2的缓冲液平衡,平衡约2-3倍的柱体积。将粗胰酶液上柱层析。用紫外蛋白监测仪280nm处检测蛋白质吸收峰,随着上柱和流出的杂蛋白量的平衡,吸收峰达到稳定,一旦上柱的胰蛋白酶量超过柱的负荷时,则胰蛋白酶溢出,使吸收峰升高,此时应停止样品上样,改用pH7.5的平衡缓冲液冲洗出杂蛋白,待洗出液的吸收回到基线后,改用0.1N的甲酸钾0.5M KCL,Ph2.5的洗脱液解析,柱的流速维持在1.5ml/min左右,收集洗脱下来的蛋白峰蛋白,测总蛋白量及比活性,并根据上柱样品的总蛋白量和比活性计算经亲和层析后胰蛋白酶比活性提高的倍数,总蛋白回收率,胰蛋白酶量。
当胰蛋白酶峰洗出,待紫外吸收回到基线后,重新用缓冲液平衡,亲和层析柱可以反复使用。
(2)胰酶蛋白和活性测定

 

Fortis品牌代理商

Fortis品牌代理商–上海金畔

Fortis品牌介绍
Fortis公司于2005年成立,以柴郡为基地,来自有丰富的色谱开发及创新历史的爱尔兰西北部。Fortis旨在为HPLC市场提供创新的产品。Fortis致力于研发及生产最新的HPLC和UPLC色谱柱,
满足和超过客户需求的产品,为客户提供高标准的服务和支持。其提供的填料范围广,从UPLC1.7um到10um。产品包括:UPLC,RP、NP、HILIC 色谱柱。Fortis提供的色谱柱优化色谱分离的峰
形、柱效、稳定性和再现性。
1. Fortis重点产品
产品包括:UPLC,RP、NP、HILIC 色谱柱。Fortis提供的色谱柱优化色谱分离的峰形、柱效、稳定性和再现性。
3. Fortis官网
http://www.fortis-technologies.com
4. 金畔生物代理Thermo Fisher Scientific品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
地 址: 上海市浦东新区东靖路699弄36栋701室
邮 编: 201208
qq: 2743691513
固话总机:021-50837765
订货热线:15221999938
网 址: WWW.JINPANBIO.COM
EMAIL:[email protected]

APSC品牌代理商

APSC品牌代理商–上海金畔
1. APSC品牌介绍
APSC主要提供有机凝胶色谱标准品(Organic GPC/SEC Standards)和水性凝胶色谱标准品(Aqueous GPC/SEC Standards)两类产品。
GPC(Gel Permeation Chromatography),凝胶渗透色谱,又称为尺寸排阻色谱(Size Exclusion Chromatography,简称SEC),它是基于体积排阻的分离机理,通过具有分子筛性质的固定相,用来分离相对分子质量较小的物质,并且还可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子化合物。
GPC是一种特殊的液相色谱,所用仪器与高效液相色谱仪类似,GPC的分离是利用体积排除机理,装填的是多孔性凝胶或微粒,孔径大小与待分离的聚合物分子相似,体积大的高分子化合物不能进入凝胶孔,最先从凝胶粒间流出,淋出体积(时间)最小,高聚物依分子量从大到小依次淋出。这样,通过做已知分子量的高分子聚合物的标准曲线,就能分析同系未知待测高分子化合物了。
2. APSC重点产品
机凝胶色谱标准品(Organic GPC/SEC Standards)和水性凝胶色谱标准品(Aqueous GPC/SEC Standards)两类产品。
3. APSC官网
http://www.ampolymer.com/
4. 金畔生物代理APSC品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
地 址: 上海市浦东新区东靖路699弄36栋701室
邮 编: 201208
qq:  2743691513
固话总机:021-50837765
订货热线:15221999938
网 址: www.jinpanbio.com
Email:[email protected]
 

上海金畔生物提供MO-BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit Components

上海金畔生物科技有限公司提供MO-BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit Components

数量: 大量
品牌: MO-BIO
供应商: 上海金畔生物
规格: 50T

PowerSoil® DNA Isolation Kit

For isolating genomic microbial DNA of the highest quality and purity from most environmental samples

Features

– Next generation method improves PCR inhibitor removal efficiency
– Processes all soil types, including difficult environmental samples
– Patented technology removes 100% of humic substances and PCR inhibitors
– Rapid protocol enables purification of DNA from 250 mg soil in 30 minutes
– Applications include biodefense, soil-borne pathogen detection, agriculture and zoology research

Description

The PowerSoil® DNA Isolation Kit* is our next generation soil DNA kit, which uses our novel, patented Inhibitor Removal Technology® to extract microbial DNA from all soil types and other environmental samples. The isolated DNA has the highest level of purity allowing for more successful PCR and QPCR amplification of organisms from the sample. The kit is ideal for processing all environmental samples including difficult types containing a high humic acid content such as compost, sediment, and manure. PCR analysis has been performed to detect a variety of organisms including both Gram-positive and Gram-negative bacteria (e.g. Bacillus subtilis, Bacillus anthracis), fungi (e.g. yeasts, molds), algae, and actinomycetes (e.g. Streptomyces), and nematodes.
The PowerSoil® DNA Isolation Kit distinguishes itself from other kits with a patented humic substance/brown color removal procedure that removes PCR inhibitors from even the most difficult soil types, promoting successful downstream PCR analysis. When choosing between the PowerSoil® DNA Isolation Kit and the UltraClean® Soil DNA Isolation Kit, use this kit for samples that are very high in humic content.
Do not let the name fool you. Our customers use this kit successfully on diverse sample types such as food (cheese, milk, meat, fruit), water, insects and fecal samples in a variety of applications including biodefense, agriculture and zoology. These soil kits are used by the USEPA, USDA, FBI and CDC for soil analysis.

Sample Kit

Research and Development

The PowerSoil® DNA Isolation Kit is More Effective for Community Analysis by PCR 

 

High Yield, Intact Genomic DNA
MO BIO
PowerSoil®
Supplier A
Supplier B
 
    M   1   2   3   4   5   6   7   8   9

Total Genomic DNA was isolated from nine different
sample types using the MO BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit
and soil DNA isolation kits from two other suppliers. All
isolations were performed following the manufacturerís
protocols. Eluted genomic DNA was displayed on a 0.8%
TAE agarose gel (15 µl per lane).
 

Confidence in Your PCR Analysis
MO BIO
PowerSoil®
Supplier A
Supplier B
   
    M   1   2   3   4   5   6   7   8   9

PCR analysis using eubacterial primers was performed
on 1 µl of the undiluted DNA eluate. PCR products
were displayed on a 0.8% TAE agarose gel.
Lane M is DNA Marker.

Lane 1 – Landfill 0-3 inches Lane 4 – Coffee Compost Lane 7 – Mud Sediment
Lane 2 – Landfill 3-6 inches Lane 5 – Marine Sediment Lane 8 – Horse Manure
Lane 3 – Late-stage Compost Lane 6 – Lake Sediment Lane 9 – Mulch Topsoil

Only DNA isolated with PowerSoil® yielded a PCR product for Landfill samples (lanes 1 and 2), Lake Sediment (lane 6) and Mulch Topsoil (lane 9). DNA isolated using other supplier kits failed to amplify products for these samples, most likely due to high levels of humic acid substances remaining in the final DNA eluate.
Positive PCR amplification using PowerSoil® was observed with 100% of the samples. PCR analysis resulted in only 44% positive amplification with supplier kits tested.

Format Silica Spin Filter Tubes
Method Bead Beating
Binding Capacity Up to 20 µg per filter
Sample Size 250 mg
Throughput 1 – 24 samples
Time 30 minutes
Equipment Required Vortex and Vortex Adapter

Kit Components

Component 12888-50 12888-100
PowerBead Tubes
Solution C1
Solution C2
Solution C3
Solution C4
Solution C5
Solution C6
Spin Filters In Tubes
Collection Tubes
50
1 x 3.3 ml
1 x 14 ml
1 x 11 ml
1 x 72 ml
1 x 27.5 ml
1 x 6 ml
50
200
100
1 x 6.6 ml
1 x 28 ml
1 x 22 ml
1 x 144 ml
1 x 55 ml
1 x 12 ml
100
400

CIL品牌代理商

CIL品牌代理商–上海金畔
1. CIL品牌介绍
美国剑桥同位素CIL是世界上第一个生产稳定性同位素标记化合物的生产商,以其领先的技术雄踞同位素分离领域。主要标记性同位素有13C、12C、D、15N、18O和17O,目前已经拥有8000多种
标记化合物。CIL的产品均能应用于不同的领域,如物理,化学,生物医学,分析,诊断研究以及环境测试。
2. CIL重点产品
稳定性同位素标记化合物
3. CIL官网
http://www.isotope.com/cil/index.cfm
4. 金畔生物代理CIL品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
地 址: 上海市浦东新区东靖路699弄36栋701室
邮 编: 201208
qq: 2743691513
固话总机:021-50837765
订货热线:15221999938
网 址: www.jinpanbio.com
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Originally posted 2015-04-25 18:13:34.

进口PEG修饰剂

上海金畔生物科技有限公司提供进口PEG修饰剂

进口PEG修饰剂,每周下单,保证货期,正常运输2~4周到货。
(RO)3Si-PEG-Si(OR)3
(mPEG)2-ALD
(MPEG)2Lys-NS
(mPEG)2-PEG-Acetaldehyde
(mPEG)2-PEG-ALD
(mPEG)2-PEG-Amine
(mPEG)2-PEG-Carbonate-NHS
(mPEG)2-PEG-Carbonate-p-Nitrophenol
(mPEG)2-PEG-glutaryl-NHS
(mPEG)2-PEG-MAL
(mPEG)2-PEG-Maleimide
(mPEG)2-PEG-NH2
(mPEG)2-PEG-NHS
(mPEG)2-PEG-N-hydroxysuccinimide
(mPEG)2-PEG-Nitrophenyl Carbonate
(mPEG)2-PEG-NPC
(mPEG)2-PEG-SG
(mPEG)2-PEG-Succinimidyl glutarate
(mPEG)2-PEG-TS
(MPEG)2赖氨酸-NS
(N-Succinimidyloxycarbonyl)pentyl-PEG-(N-Succinimidyloxycarbonyl)pentyl
(RO)3Si-PEG-Si(OR)3
3-arm-PEG-COOH
3-Arm-PEG-Mal
3-Arm-PEG-NH2
3-Arm-PEG-NHS
4-Arm-mPEG
4-Arm-PEG-5-(N-Succinimidyloxycarbonyl)pentyl
4-Arm-PEG-Ac
4-Arm-PEG-Acid
4-arm-PEG-ACRL
4arm-PEG-ACRL-10K
4arm-PEG-ACRL-20K
4-arm-PEG-Acrylate
4-Arm-PEG-Amine
4-Arm-PEG-Azide
4-Arm-PEG-Carboxyl
4-arm-PEG-CM
4arm-PEG-CM-10K
4-Arm-PEG-COOH
4-Arm-PEG-DSPE
4-Arm-PEG-EP
4arm-PEG-EPOX-10K
4arm-PEG-EPOX-20K
4-Arm-PEG-Epoxide
4-arm-PEG-Hydroxy
4-Arm-PEG-Mal
4arm-PEG-MAL-10K
4arm-PEG-MAL-20K
4-Arm-PEG-Maleimide
4-Arm-PEG-N3
4-Arm-PEG-NH2
4arm-PEG-NH2-10K
4arm-PEG-NH2-20K
4-Arm-PEG-NH2-SC
4-Arm-PEG-NH2-SS
4-Arm-PEG-NHS
4-Arm-PEG-N-hydroxysuccinimide
4-Arm-PEG-Nitrophenyl Carbonate
4-Arm-PEG-NPC
4-Arm-PEG-OH
4-Arm-PEG-SCM
4arm-PEG-SCM-10K
4-Arm-PEG-SG
4-Arm-PEG-SH
4arm-PEG-SH-10K
4-Arm-PEG-SH-SG
4-Arm-PEG-SH-SS
4-Arm-PEG-SS
4-Arm-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
4-Arm-PEG-Succinimidyl glutarate
4-Arm-PEG-Sulphydryl
4-arm-PEG-Thiol
4-Arm-PEG-Thiol (Sulphydryl)
4臂聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯
4臂聚乙二醇氨基
4臂聚乙二醇胺基
4臂聚乙二醇丙烯酸
4臂聚乙二醇丙烯酸酯
4臂聚乙二醇叠氮
4臂聚乙二醇二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺
4臂聚乙二醇琥珀酰亚胺
4臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯
4臂聚乙二醇环氧丙烷
4臂聚乙二醇硫醇
4臂聚乙二醇马来酰亚胺
4臂聚乙二醇羟基
4臂聚乙二醇巯基 (硫醇)
4臂聚乙二醇羧基
4臂聚乙二醇硝苯基碳酸盐
689580
689696
6-aminohexyl-PEG-6-aminohexyl
6-Arm-PEG-Ac
6-Arm-PEG-EP
6-Arm-PEG-NCO
6-Arm-PEG-NH2
6-Arm-PEG-NHS
6-Arm-PEG-OH
6-Arm-PEG-SG
6-Arm-PEG-SH
6-Arm-PEG-SS
6-氨基己基聚乙二醇6-氨基己基
8-Arm-PEG-Amine
8-Arm-PEG-Carboxyl
8-Arm-PEG-CM
8-Arm-PEG-COOH
8-arm-PEG-Hydroxy
8-Arm-PEG-NH2
8-Arm-PEG-NHS
8-Arm-PEG-N-hydroxysuccinimide
8-Arm-PEG-Nitrophenyl Carbonate
8-Arm-PEG-NPC
8-Arm-PEG-OH
8-Arm-PEG-SG
8-Arm-PEG-Succinimidyl glutarate
8臂聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯
8臂聚乙二醇胺基
8臂聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯
8臂聚乙二醇羟基
8臂聚乙二醇羧基
8臂聚乙二醇硝苯基碳酸盐
a,w- Di-maleinimids
a,w- Di-NHS esters
AA-PEG-AA
Acetic Acid-PEG-Acetic Acid
Acid-PEG-Fmoc-amine X=COOH,Y=Fmoc-NH,n=11
Ac-PEG-Ac
Ac-PEG-MAL
Ac-PEG-Maleimide
Ac-PEG-SCM
Ac-PEG-SVA
ACRL-PEG-ACRL-1000
ACRL-PEG-ACRL-10K
ACRL-PEG-ACRL-2000
ACRL-PEG-ACRL-20K
ACRL-PEG-ACRL-3400
ACRL-PEG-ACRL-5000
ACRL-PEG-MAL-3400
ACRL-PEG-SCM-2000
ACRL-PEG-SCM-3400
ACRL-PEG-SCM-5000
ACRL-PEG-SVA-3400
Acrylate-PEG-Acrylate
Acrylate-PEG-Maleimide
Acrylate-PEG-SCM
Acrylate-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Acrylate-PEG-Succinimidyl Valerate
Acrylate-PEG-SVA
Aldehyde-PEG-Aldehyde
ALD-PEG-ALD
a-Methoxy-w-azides
a-Methoxy-w-maleinimids
a-Methoxy-w-NHS esters
Amine-PEG-Amine
Amine-PEG-Amine X=Y=NH2,n=18
Amine-PEG-Azido
Amine-PEG-Boc-amine,X=NH2,Y=Boc-NH,n=6
Amine-PEG-Carboxyl
Amine-PEG-Silane
Amine-PEG-Thiol
Amine-PEG-Valeric Acid
Amino-PEG-Carboxyl
Amino-PEG-CM
Amino-PEG-COOH
Azide-PEG-amine
Azide-PEG-amine X=NH2,Y=N3,n=5
azide-PEG-azide
Azide-PEG-Biotin
Azide-PEG-Carboxyl
Azide-PEG-hydroxyl
Azide-PEG-N-hydroxysuccinimide
Azido-PEG
Azido-PEG amine
a-氨基盐酸盐-w-羧基聚乙二醇
a-羟基-w-琥珀酰亚胺丙酸酯聚乙二醇
a-羟基-w-马来酰亚胺聚乙二醇
a-羟基-w-羧基聚乙二醇
bALD-PEG-bALD
bALD-PEG-bALD-10K
bALD-PEG-bALD-3400
bALD-PEG-bALD-5K
Biotin PEG acid
Biotin PEG amine
Biotin PEG disulfide
Biotin-CONH-PEG-NH2
Biotin-CONH-PEG-O-C3H6-CONHS
Biotin-CONH-PEG-O-C3H6-COOH
Biotin-PEG-Amino
Biotin-PEG-Biotin
Biotin-PEG-Carboxyl
Biotin-PEG-COOH
Biotin-PEG-disulfide
Biotin-PEG-FITC
Biotin-PEG-Fluorescein
Biotin-PEG-Mal
Biotin-PEG-MAL-3400
Biotin-PEG-MAL-5000
Biotin-PEG-Maleimide
Biotin-PEG-Mercaptopropionyl
Biotin-PEG-Methacrylamide
Biotin-PEG-NH2
Biotin-PEG-NH2-2000
Biotin-PEG-NH2-3400
Biotin-PEG-NH2-5000
Biotin-PEG-NHS
Biotin-PEG-N-hydroxysuccinimide
Biotin-PEG-S2
Biotin-PEG-SC
Biotin-PEG-SC-2000
Biotin-PEG-SC-3400
Biotin-PEG-SC-5000
Biotin-PEG-SCM
Biotin-PEG-SCM-3400
Biotin-PEG-SCM-5000
Biotin-PEG-SH
Biotin-PEG-SIL-3400
Biotin-PEG-Silane
Biotin-PEG-Succinimidyl Carbonate
Biotin-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Biotin-PEG-Succinimidyl Valerate
Biotin-PEG-SVA
Biotin-PEG-SVA-3400
Biotin-PEG-SVA-5000
BO-050TS
Boc-amino PEG amine
Boc-amino PEG diglycolic acid
Boc-amino PEG propionic acid
BOC-NH-PEG-Amine
BOC-NH-PEG-COOH
BOC-NH-PEG-diglycolic acid
Boc-NH-PEG-Methacrylamide
Boc-NH-PEG-NH2
BOC-NH-PEG-NH2-2000
BOC-NH-PEG-NH2-3400
BOC-NH-PEG-NHS
BOC-NH-PEG-Nitrophenyl Carbonate
BOC-NH-PEG-NPC
BOC-NH-PEG-NPC-5000
Boc-NH-PEG-O-C3H6-CONHS
Boc-NH-PEG-O-C3H6-COOH
BOC-NH-PEG-OH
BOC-NH-PEG-propionic acid
BOC-NH-PEG-SC
BOC-NH-PEG-SC-3400
BOC-NH-PEG-SC-5000
Boc-NH-PEG-SCM
BOC-NH-PEG-SCM-1000
BOC-NH-PEG-SCM-2000
BOC-NH-PEG-SCM-3400
BOC-NH-PEG-SCM-5000
BOC-NH-PEG-SH
BOC-NH-PEG-Succinimidyl Carbonate
BOC-NH-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
BOC-NH-PEG-TS
BOC-NH-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
BOC-NH-聚乙二醇氨基
BOC-NH-聚乙二醇丙酸
BOC-NH-聚乙二醇二甘醇酸
BOC-NH-聚乙二醇琥珀酰亚胺
BOC-NH-聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯
BOC-NH-聚乙二醇硫醇
BOC-NH-聚乙二醇羟基
BOC-NH-聚乙二醇羧基
BOC-NH-聚乙二醇硝苯基碳酸盐
Boc-PEG-carbonateNHS
Br-PEG-Br
Butyraldehyde-PEG-Butyraldehyde
Carbonyl imidazole-PEG-Carbonyl imidazole
Carboxylic acid-PEG-Carboxylic acid
Carboxyl-PEG-Carboxyl
Carboxyl-PEG-Carboxyl,X=Y=COOH n=12
Carboxyl-PEG-Fmoc-amine X=COOH,Y=Fmoc-NH,n=11
Carboxyl-PEG-Silane
Carboxymethyl-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Carboxymethyl-PEG-Thiol
CDI-PEG-CDI
CH3O-PEG-Br
CH3O-PEG-C2H4-mal
CH3O-PEG-C2H4-N3
CH3O-PEG-NH2
CH3O-PEG-NHCO-C2H4-CONHS
CH3O-PEG-NH-CO-C4H8-CHO
CH3O-PEG-NHCO-CH2-CH2-COOH
CH3O-PEG-OH
CH3O-PEG-SH
CM-PEG-CM
CM-PEG-CM-1000
CM-PEG-CM-2000
CM-PEG-CM-3400
CM-PEG-CM-5000
CM-PEG-SCM
CM-PEG-SCM-35K
CM-PEG-SH
CM-PEG-SH-1000
CM-PEG-SH-2000
CM-PEG-SH-3400
CM-PEG-SH-5000
CM-PEG-Thiol
CONHNH2-PEG-CONHNH2
CONHS-PEG-S-Trt
COOH-PEG-COOH
COOH-PEG-disulfide
COOH-PEG-Fmoc-NH
COOH-PEG-S2
COOH-PEG-SCM
COOH-PEG-SH
COOH-PEG-Silane
DE-034AS
DE-034GS
DE-034HS
DE-034PA
DE-050SH
DE-100GS
DE-100HS
DE-100MA
DE-100PA
DE-100SH
DE-200GS
DE-200HS
DE-200MA
DE-200PA
DE-200SH
DE-300PA
Decaethylene Glycol
Distearoylphosphatidylethanolamine-PEG-Acid
Distearoylphosphatidylethanolamine-PEG-Amine
Distearoylphosphatidylethanolamine-PEG-Biotin
Distearoylphosphatidylethanolamine-PEG-Maleimide
Distearoylphosphatidylethanolamine-PEG-N-hydroxysuccinimide
Distearoylphosphatidylethanolamine-PEG-Orthopyridyl Disulfide
Distearoylphosphatidylethanolamine-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Disulfide-PEG-SPA
Dodecaethylene Glycol
DSPE-020CN
DSPE-020GS
DSPE-020MA
DSPE-020PA
DSPE-050CN
DSPE-050MA
DSPE-050PA
DSPE-AM0530K
DSPE-Comb-shaped PEG
DSPE-Multi-arm PEG
DSPE-PEG
DSPE-PEG-Acid
DSPE-PEG-Amine
DSPE-PEG-Amino
DSPE-PEG-Biotin
DSPE-PEG-Biotin-3400
DSPE-PEG-COOH
DSPE-PEG-Mal
DSPE-PEG-MAL-3400
DSPE-PEG-Maleimide
DSPE-PEG-NH2
DSPE-PEG-NH2-2000
DSPE-PEG-NHS
DSPE-PEG-N-hydroxysuccinimide
DSPE-PEG-OPSS
DSPE-PEG-SCM
DSPE-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
DSPE-PG8G
DSPE-Polyglycerine
DSPE-PTE020
Epoxide-PEG-Epoxide
EPOX-PEG-EPOX-2K
EPOX-PEG-EPOX-5K
EP-PEG-EP
FITC-PEG-COOH
FITC-PEG-MAL
FITC-PEG-NH2
FITC-PEG-NHS
FITC-PEG-SCM
FITC-PEG-SVA
Fluorescein-PEG-Amine
Fluorescein-PEG-Carboxyl
Fluorescein-PEG-COOH
Fluorescein-PEG-MAL
Fluorescein-PEG-Maleimide
Fluorescein-PEG-NH2
Fluorescein-PEG-NHS
Fluorescein-PEG-N-hydroxysuccinimide
Fluorescein-PEG-SCM
Fluorescein-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Fluorescein-PEG-Succinimidyl Valerate
Fluorescein-PEG-SVA
FLUOR-PEG-MAL-3400
FLUOR-PEG-NH2-5000
FLUOR-PEG-SCM-20K
FLUOR-PEG-SCM-3400
FLUOR-PEG-SCM-5000
FLUOR-PEG-SVA-3400
FLUOR-PEG-SVA-5000
Fmoc-amino PEG propionic acid
Fmoc-NH-PEG-Amino
FMOC-NH-PEG-Amino*TFA salt
FMOC-NH-PEG-Carboxyl
FMOC-NH-PEG-Carboxymethyl
FMOC-NH-PEG-CM-3400
FMOC-NH-PEG-COOH
Fmoc-NH-PEG-Hydroxy
Fmoc-NH-PEG-NH2
FMOC-NH-PEG-NH2*TFA salt
FMOC-NH-PEG-NH2-TFA-1K
FMOC-NH-PEG-NH2-TFA-5K
Fmoc-NH-PEG-NHS
Fmoc-NH-PEG-O-C3H6-CONHS
Fmoc-NH-PEG-O-C3H6-COOH
Fmoc-NH-PEG-OH
FMOC-NH-PEG-OH-5000
Fmoc-NH-PEG-propionic acid
Fmoc-NH-PEG-SCM
FMOC-NH-PEG-SCM-2000
FMOC-NH-PEG-SCM-3400
FMOC-NH-PEG-SCM-5000
Fmoc-NH-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Fmoc-NH-聚乙二醇胺基
FMOC-NH-聚乙二醇胺基*三氟乙酸盐
Fmoc-NH-聚乙二醇丙酸
Fmoc-NH-聚乙二醇琥珀酰亚胺
Fmoc-NH-聚乙二醇羟基
FMOC-NH-聚乙二醇羧基
GALA-NHS-35K
GALA-PEG-NHS
GALA-PEG-N-hydroxysuccinimide
GA-PEG-GA
GL2-400GS2
GL2-400MA
GL2-400NP
GL2-400PA
GL2-400TS
GLUC-NHS-35K
GLUC-PEG-NHS
GLUC-PEG-N-hydroxysuccinimide
Glutaric Acid-PEG-Glutaric Acid
H2N-PEG-NH-Boc
H2N-PEG-NHCO-C2H4-S-Trt
H2N-PEG-O-C3H6-COOH x HCl
HCl.NH2-PEG-Carboxymethyl
HCl.NH2-PEG-COOH
Heptaethylene Glycol
Hexaethylene Glycol
HGEO-200GS
HGEO-200NP
HO-020PA
HO-034PA
HO-050AL
HO-050PA
HO-100AL
HO-200AL
HO-300AL
HOOC-PEG-COOH
HOOC-PEG-Silane
HO-P-COOH-10K-1G
HO-P-COOH-20K-1G
HO-P-COOH-40K-1G
HO-P-COOH-5K-1G
HO-PEG-Acetaldehyde
HO-PEG-ALD
HO-PEG-Amino
HO-PEG-Carboxymethyl
HO-PEG-CM
HO-PEG-CM-3400
HO-PEG-COOH
HO-PEG-MAL
HO-PEG-MAL-3400
HO-PEG-MAL-5000
HO-PEG-Maleimide
HO-PEG-N3
HO-PEG-NH2
HO-PEG-NH2-1000
HO-PEG-NH2-3400
HO-PEG-NH2-35K
HO-PEG-NH2-5000
HO-PEG-NH-Boc
HO-PEG-NHCO-C2H4-CONH-NH-Boc
HO-PEG-NHCO-C2H4-COOH
HO-PEG-NHCO-C2H4-SH
HO-PEG-NHCO-C2H4-S-Trt
HO-PEG-NHCO-S-Trt
HO-PEG-OH
HO-PEG-SPA
HO-PEG-Succinimidyl propionate
HO-PEG-tBu-Propionate
HO-PEG-Tosylate
HO-P-MAL-10K-1G
HO-P-MAL-20K-1G
HO-P-MAL-5K-1G
HO-P-SPA-10K-1G
HO-P-SPA-20K-1G
HO-P-SPA-40K-1G
HO-P-SPA-5K-1G
HS-C2H4-CONH-PEG-O-C3H6-COOH
HS-PEG-Carboxyl
HS-PEG-NH2 x HCl
HS-PEG-NHCO-C2H4-CONH-NH-Boc
HS-PEG-SH
Hydrazide-PEG-Hydrazide
Hydroxyl-PEG-propylaldehyde
Hydroxyl-PEG-propylamine
Hydroxy-PEG-Amino
Hydroxy-PEG-Carboxyl
Hydroxy-PEG-Hydroxy
Hydroxy-PEG-Maleimide
Hydroxy-PEG-Succinimidyl propionate
Hydroxy-PEG-Tosylate
HZ-PEG-HZ
HZ-PEG-HZ-2000
HZ-PEG-HZ-3400
Isocyanate-PEG-Isocyanate
MA-050TS
MAc-PEG-MAc
M-ALD-20K
Maleimide-PEG-Amino
Maleimide-PEG-carbonate NHS
Maleimide-PEG-Carboxyl
Maleimide-PEG-Maleimide
Maleimide-PEG-NHS
Maleimide-PEG-N-hydroxysuccinimide
Maleimide-PEG-SCM
Maleimide-PEG-Silane
Maleimide-PEG-Succinimidyl Carbonate
Maleimide-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Maleimide-PEG-Succinimidyl Valerate
Maleimide-PEG-SVA
Maleimidopropionyl-PEG NHS ester
Malhex-NH-PEG-NHCO-Biotin
Malhex-NH-PEG-O-C3H6-CONHS
Malhex-NH-PEG-O-C3H6-COOH
MAL-PEG-Amino
Mal-PEG-Biotin
MAL-PEG-Carboxyl
Mal-PEG-COOH
Mal-PEG-Mal
MAL-PEG-MAL-10K
MAL-PEG-MAL-2K
MAL-PEG-MAL-3400
MAL-PEG-MAL-5K
MAL-PEG-NH2
Mal-PEG-NHS
MAL-PEG-SC
MAL-PEG-SCM
MAL-PEG-SCM-10K
MAL-PEG-SCM-2000
MAL-PEG-SCM-3400
MAL-PEG-SCM-5000
MAL-PEG-Silane
Mal-PEG-SVA
MAL-PEG-SVA-3400
MAL-PEG-TS
ME-020AS
ME-020CS
ME-020MA
ME-020SH
ME-050AL
ME-050AS
ME-050CS
ME-050GS
ME-050HS
ME-050MA
ME-050SH
ME-100AL
ME-100SH
ME-120MA
ME-200AL
ME-200GS
ME-200HS
ME-200MA
ME-200SH
ME-300AL
ME-300GS
ME-300MA
ME-300SH
MENP-10T
MENP-20H
MENP-20T
MENP-30T
MENP-50H
MEPA-020H
MEPA-050H
MEPA-12T
MEPA-20T
MEPA-30T
Mesylate-PEG-Mesylate
Methacrylate-PEG-Methacrylate
Methoxyl Decaethylene Glycol
Methoxyl Dodecaethylene Glycol
Methoxyl Heptaethylene Glycol
Methoxyl Hexaethylene Glycol
Methoxyl Nonaethylene Glycol
Methoxyl Octaethylene Glycol
Methoxyl Pentaethylene Glycol
Methoxyl Undecaethlyene Glycol
Methoxy-PEG-Acetaldehyde
Methoxy-PEG-Acrylate
Methoxy-PEG-Alkyne
Methoxy-PEG-Amine
Methoxy-PEG-Amino
Methoxy-PEG-Azide
Methoxy-PEG-Azido
Methoxy-PEG-Biotin
Methoxy-PEG-b-Poly(methyl methacrylate)
Methoxy-PEG-b-Poly(ε-caprolactone)
Methoxy-PEG-b-Polyacrylonitrile
Methoxy-PEG-b-Polyisoprene
Methoxy-PEG-b-Polystyrene
Methoxy-PEG-Butyraldehyde
Methoxy-PEG-Carbonyl imidazole
Methoxy-PEG-Carboxyl
Methoxy-PEG-CH2NH2
Methoxy-PEG-Dansyl
Methoxy-PEG-Distearoylphosphatidylethanolamine
Methoxy-PEG-Epoxide
Methoxy-PEG-FITC
Methoxy-PEG-Fluorescent Dye
Methoxy-PEG-Hydrazide
Methoxy-PEG-hydroxyl
Methoxy-PEG-Isocyanate
Methoxy-PEG-Maleimide
Methoxy-PEG-Mesylate
Methoxy-PEG-mPEG-Succinimidyl Valerate
Methoxy-PEG-Nitrophenyl Carbonate
Methoxy-PEG-Orthopyridyl Disulfide
Methoxy-PEG-Poly(lactic acid)
Methoxy-PEG-PPMaleimide
Methoxy-PEG-Propionaldehyde
Methoxy-PEG-propionic acid
Methoxy-PEG-p-tolylsulfonyl
Methoxy-PEG-Rhodamine
Methoxy-PEG-Silane
Methoxy-PEG-Succinimidyl butanoate
Methoxy-PEG-Succinimidyl Carbonate
Methoxy-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Methoxy-PEG-Succinimidyl Glutarate
Methoxy-PEG-Succinimidyl propionate
Methoxy-PEG-Succinimidyl Succinate
Methoxy-PEG-Succinimidyl succinate ester
Methoxy-PEG-Texas Red
Methoxy-PEG-Thiol
Methoxy-PEG-Thiol (Sulphydryl)
Methoxy-PEG-Tosylate
Methoxy-PEG-Vinylsulfone
Methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-aspartic acid sodium salt)
Methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-glutamic acid sodium salt)
Methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-lysine hydrochloride)
Methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-lysine trifluoroacetate)
M-MAL-20K
M-NH2-20K
MP-ALD-10K-5G
MP-ALD-20K-5G
MP-ALD-5K-5G
MP-B-PAN-10K-1G
MP-B-PAN-20K-1G
MP-B-PAN-5K-1G
MP-B-PCL-10K-1G
MP-B-PCL-20K-1G
MP-B-PCL-5K-1G
MP-B-PI-10K-1G
MP-B-PI-20K-1G
MP-B-PMMA-10K-1G
MP-B-PMMA-20K-1G
MP-B-PMMA-5K-1G
MP-B-PS-10K-1G
MP-B-PS-15K-1G
MP-B-PS-20K-1G
mPEG acid
mPEG disulfide
mPEG thiol
mPEG-(CH2)5COO-NHS
mPEG1000-b-PLD10
mPEG1000-b-PLD100
mPEG1000-b-PLD50
mPEG1000-b-PLE10
mPEG1000-b-PLE100
mPEG1000-b-PLE200
mPEG1000-b-PLE50
mPEG1000-b-PLKC10
mPEG1000-b-PLKC100
mPEG1000-b-PLKC200
mPEG1000-b-PLKC50
mPEG1000-b-PLKF10
mPEG1000-b-PLKF100
mPEG1000-b-PLKF200
mPEG1000-b-PLKF50
mPEG-11
mPEG20000-b-PLD10
mPEG20000-b-PLD100
mPEG20000-b-PLD50
mPEG20000-b-PLE10
mPEG20000-b-PLE100
mPEG20000-b-PLE200
mPEG20000-b-PLE50
mPEG20000-b-PLKC10
mPEG20000-b-PLKC100
mPEG20000-b-PLKC200
mPEG20000-b-PLKC50
mPEG20000-b-PLKF10
mPEG20000-b-PLKF100
mPEG20000-b-PLKF200
mPEG20000-b-PLKF50
mPEG2-ALD
mPEG2-NHS
mPEG5000-b-PLD10
mPEG5000-b-PLD100
mPEG5000-b-PLD50
mPEG5000-b-PLE10
mPEG5000-b-PLE100
mPEG5000-b-PLE200
mPEG5000-b-PLE50
mPEG5000-b-PLKC10
mPEG5000-b-PLKC100
mPEG5000-b-PLKC200
mPEG5000-b-PLKC50
mPEG5000-b-PLKF10
mPEG5000-b-PLKF100
mPEG5000-b-PLKF200
mPEG5000-b-PLKF50
mPEG-7
mPEG-AC
mPEG-Acetaldehyde
mPEG-Acetylene
mPEG-acid (x=COOH,n=11))
mPEG-Acr
MPEG-ACRL-10K
MPEG-ACRL-5000
mPEG-Acrylate
mPEG-ALC
mPEG-ALD
MPEG-ALD-20K
MPEG-ALD-30K
MPEG-ALD-5000
mPEG-Alkyne
mPEG-Amine
mPEG-Amino
mPEG-Azide
mPEG-Azido
mPEG-bALD
MPEG-bALD-20K
MPEG-bALD-30K
MPEG-bALD-5K
mPEG-Biotin
MPEG-Biotin-2000
MPEG-Biotin-20K
MPEG-Biotin-5000
mPEG-b-PAN
mPEG-b-PCL
mPEG-b-PI
mPEG-b-PLD
mPEG-b-PLE
mPEG-b-PLKC
mPEG-b-PLKF
mPEG-b-PMMA
mPEG-b-Poly(methyl methacrylate)
mPEG-b-Poly(ε-caprolactone)
mPEG-b-Polyacrylonitrile
mPEG-b-Polyisoprene
mPEG-b-Polystyrene
mPEG-b-PS
mPEG-Br
mPEG-BTC
mPEG-butyrALD
mPEG-Butyraldehyde
mPEG-Carbonyl imidazole
mPEG-Carboxyl (x=COOH,n=11))
mPEG-Carboxymethyl
mPEG-carboxymethyl-NHS
mPEG-carboxypentyl-NHS
mPEG-CDI
mPEG-CH2COO-NHS
mPEG-CH2NH2
mPEG-CM
MPEG-CM-10K
MPEG-CM-2000
MPEG-CM-20K
MPEG-CM-5000
mPEG-COCH2CH2 CH2COO-NHS
mPEG-COCH2CH2COO-NHS
mPEG-CONHNH2
mPEG-COOH
mPEG-Dansyl
mPEG-Distearoylphosphatidylethanolamine
mPEG-disulfide
mPEG-DSPE
MPEG-DSPE-5000
mPEG-EP
mPEG-Epoxide
mPEG-FITC
mPEG-Fluorescent Dye
mPEG-glutaryl-NHS
mPEG-Hydrazide
mPEG-Hydroxy
MPEG-HZ-10K
MPEG-HZ-2000
MPEG-HZ-20K
MPEG-HZ-5000
mPEG-iodoacetamide
mPEG-Isocyanate
mPEG-MAc
mPEG-MAL
MPEG-MAL-10K
mPEG-MAL-2000
MPEG-MAL-20K
MPEG-MAL-30K
MPEG-MAL-5000
mPEG-Maleimide
mPEG-Mesylate
mPEG-mPEG-Succinimidyl Valerate
mPEG-Ms
mPEG-N3
mPEG-NCO
mPEG-NH2
MPEG-NH2-1000
MPEG-NH2-10K
MPEG-NH2-2000
MPEG-NH2-20K
MPEG-NH2-30K
MPEG-NH2-5000
MPEG-NH2-550
mPEG-NH2-BALD
mPEG-NH2-PALD
mPEG-NHNH2
mPEG-NHS
mPEG-Nitrophenyl Carbonate
mPEG-nitrophenylcarbonate
mPEG-NPC
mPEG-NPC-1000
mPEG-NPC-10K
mPEG-NPC-2000
mPEG-NPC-20K
MPEG-NPC-5000
mPEG-OCOOPhNO2
mPEG-OH
mPEG-OPSS
MPEG-OPSS-10K
MPEG-OPSS-2000
MPEG-OPSS-5000
mPEG-Orthopyridyl Disulfide
MPEG-OTS
mPEG-PA
mPEG-PALD
mPEG-PAN
mPEG-PCL
mPEG-PI
mPEG-PLA
MPEG-PLA-5000
mPEG-PMMA
mPEG-Poly(lactic acid)
mPEG-PPMAL
mPEG-PPMaleimide
mPEG-Propionaldehyde
mPEG-propionic acid
mPEG-propylaldehyde
mPEG-propylamine
mPEG-PS
MPEG-p-tolylsulfonyl
mPEG-Rhodamine
mPEG-S
mPEG-S2
mPEG-SBA
mPEG-SC
mPEG-SCM
MPEG-SCM-10K
MPEG-SCM-20K
mPEG-SCM-2K
MPEG-SCM-5000
mPEG-SG
MPEG-SG-10K
MPEG-SG-2000
MPEG-SG-20K
MPEG-SG-5000
MPEG-SG-50K
mPEG-SH
MPEG-SH-1000
MPEG-SH-10K
MPEG-SH-2000
MPEG-SH-20K
MPEG-SH-5000
MPEG-SIL-1000
MPEG-SIL-2000
MPEG-SIL-5000
mPEG-Silane
mPEG-SPA
MPEG-SPA-550-1g
mPEG-SS
MPEG-SS-20K
MPEG-SS-30K
MPEG-SS-5000
mPEG-Succinic acid
mPEG-Succinimidyl butanoate
mPEG-Succinimidyl Carbonate
mPEG-Succinimidyl Carboxymethyl
mPEG-Succinimidyl Glutarate
mPEG-Succinimidyl propionate
mPEG-Succinimidyl Succinate
mPEG-Succinimidyl succinate ester
mPEG-succinyl-NHS
mPEG-SVA
MPEG-SVA-10K
MPEG-SVA-2000
MPEG-SVA-20K
MPEG-SVA-30K
MPEG-SVA-5000
mPEG-Texas Red
mPEG-thiol
mPEG-Thiol (Sulphydryl)
mPEG-Thiol (x=SH,n=6)
mPEG-TOSYL
MPEG-TOSYL-30K
mPEG-Tosylate
mPEG-Ts
mPEG-urethane-BALD
mPEG-urethane-PALD
mPEG-Vinylsulfone
mPEG-VS
MP-MAL-10K-5G
MP-MAL-20K-5G
MP-MAL-5K-5G
MP-NH2-10K-5G
MP-NH2-5K-5G
MP-SBA-10K-5G
MP-SBA-20K-5G
MP-SBA-5K-5G
MP-SC-10K-5G
MP-SC-20K-5G
MP-SC-40K-5G
MP-SC-5K-5G
MP-SPA-10K-5G
MP-SPA-20K-5G
MP-SPA-5K-5G
MP-SS-10K-5G
MP-SS-20K-5G
MP-SS-40K-5G
MP-SS-5K-5G
M-SC-20K
M-SCM-20K
M-SCM-30K
M-SCM-35K
M-SH-20K
Ms-PEG-Ms
Multi-branched PEG
M-VS-20K
N3-PEG-amine
N3-PEG-Biotin
N3-PEG-Carboxyl
N3-PEG-COOH
N3-PEG-Diglycolic Acid
N3-PEG-hydroxyl
N3-PEG-N3
N3-PEG-NH2
N3-PEG-NHS
N3-PEG-OH
NCO-PEG-NCO
NH2HCL-P-COOH-10K-1G
NH2HCL-P-COOH-20K-1G
NH2HCL-P-COOH-5K-1G
NH2NH-PEG-NHNH2
NH2-PEG-Azido
NH2-PEG-Boc-NH
NH2-PEG-CM
NH2-PEG-CM-1000
NH2-PEG-CM-10K
NH2-PEG-CM-2000
NH2-PEG-CM-3400
NH2-PEG-CM-5000
NH2-PEG-COOH
NH2-PEG-N3
NH2-PEG-NH2
NH2-PEG-NH2-10K
NH2-PEG-NH2-1K
NH2-PEG-NH2-20K
NH2-PEG-NH2-2K
NH2-PEG-NH2-3400
NH2-PEG-NH2-35K
NH2-PEG-NH2-5K
NH2-PEG-OH
NH2-PEG-SH
NH2-PEG-SH-1K
NH2-PEG-SH-20K
NH2-PEG-SH-5K
NH2-PEG-Silane
NH2-PEG-S-Trt
NH2-PEG-VA
NH2-PEG-VA-3400
NH2-PEG-VA-5K
NH2-PEG-Valeric Acid
NHS-PEG-disulfide
NHS-PEG-NHS
NHS-PEG-S2
N-hydroxysuccinimide-PEG-N-hydroxysuccinimide
Nitrophenyl Carbonate -PEG-Nitrophenyl Carbonate
Nitrophenyl Carbonate-PEG-Nitrophenyl Carbonate
Nonaethylene Glycol
NPC-PEG-NPC
NPC-PEG-NPC-2000
NPC-PEG-NPC-3400
N-羟基琥珀酰亚胺聚乙二醇二硫
N-羟基琥珀酰亚胺酯-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯
Octacosaethylene Glycol
Octaethylene Glycol
OPPS-PEG-OPSS
OPSS-PEG-Carboxyl
OPSS-PEG-CM-5000
OPSS-PEG-COOH
OPSS-PEG-NHS
OPSS-PEG-N-hydroxysuccinimide
OPSS-PEG-OPSS
OPSS-PEG-OPSS-10K
OPSS-PEG-OPSS-2000
OPSS-PEG-OPSS-3400
OPSS-PEG-SC
OPSS-PEG-SCM
OPSS-PEG-SCM-3400
OPSS-PEG-Succinimidyl Carbonate
OPSS-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
OPSS-PEG–Succinimidyl Carboxymethyl
OPSS-PEG-Succinimidyl Valerate
OPSS-PEG-SVA
OPSS-PEG-SVA-2000
OPSS-PEG-SVA-3400
OPSS-PEG-SVA-5000
Orthopyridyl Disulfide-PEG-Carboxyl
Orthopyridyl Disulfide-PEG-N-hydroxysuccinimide
Orthopyridyl Disulfide-PEG-Orthopyridyl Disulfide
Orthopyridyl Disulfide-PEG-Succinimidyl Carbonate
Orthopyridyl Disulfide-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Orthopyridyl Disulfide-PEG-Succinimidyl Valerate
PEG8A-AM-10k
PEG8A-AM-20k
PEG8A-AM-40k
PEG8A-C-10k
PEG8A-C-20k
PEG8A-C-40k
PEG8A-N-10k
PEG8A-N-20k
PEG8A-N-40k
PEG-Diamine
PEG-dibenzoate
PEG-dicarboxymethyl NHS
PEG-dicarboxypentylNHS
PEG-diglutarateNHS
PEG-dimaleimide
PEG-dimethyl ether
PEG-dipropylamine
PEG-dithiol
PEG-octaglutaryl NHS
PEG-octanitrophenylcarbonate
Peg-S01
PEG-SET-NHS
PEG-sorbitan tetraoleate
PEG-sorbitol hexaoleate
PEG-tetracarboxypentyl NHS
PEG-tetraglutaryl NHS
PEG-tetramaleimide
PEG-tetranitrophenylcarbonate
PEG-tetrapropylamine
PEG-tetrathiol
RB-PEG-NH2
Rhodamine B-PEG-Amine
Rhodamine-PEG-NH2
SA-PEG-SA
SCM-PEG-SCM
SCM-PEG-SCM-3400
SC-PEG-CM
SC-PEG-CM(methyl ester)
SC-PEG-CMme-3400
SC-PEG-COOH
SG-PEG-SG
SG-PEG-SG-10K
SG-PEG-SG-2000
SG-PEG-SG-3400
SG-PEG-SG-5K
SH-PEG-Biotin
SH-PEG-COOH
SH-PEG-IDA
SH-PEG-NH2
SH-PEG-OH
SH-PEG-SH
SH-PEG-SH(Sulphydryl)
SH-PEG-SH-10K
SH-PEG-SH-3400
SH-PEG-SH-5K
SH-PEG-Silane
Silane-PEG-Amine
Silane-PEG-NH2
Silane-PEG-Silane
SIL-PEG-SIL-3400
SS-PEG-SS
SS-PEG-SS-2000
SS-PEG-SS-3400
Succinic Acid-PEG-Succinic Acid
Succinimidyl Carbonate-PEG-Carboxyl
Succinimidyl Carbonate-PEG-COOH
Succinimidyl Carboxymethyl-PEG-Succinimidyl Carboxymethyl
Succinimidyl Glutarate-PEG-Succinimidyl Glutarate
Succinimidyl Succinate-PEG-Succinimidyl Succinate
Sulphydryl-PEG-Biotin
Sulphydryl-PEG-COOH
Sulphydryl-PEG-Silane
Thiol-PEG-acid X=SH,Y=COOH,n=7
Thiol-PEG-Amine (Sulphydryl)
Thiol-PEG-Biotin
Thiol-PEG-Carboxyl
Thiol-PEG-Carboxyl (Sulphydryl)
Thiol-PEG-Carboxyl X=SH,Y=COOH,n=7
Thiol-PEG-Hydroxy
Thiol-PEG-OH
Thiol-PEG-Silane (Sulphydryl)
Thiol-PEG-Thiol
Thiol-PEG-Thiol (Sulphydryl)
Tosylate-PEG-Tosylate
TOSYL-PEG-TOSYL
TOSYL-PEG-TOSYL-35K
Trt-S-C2H4-CONH-PEG-O-C3H6-CONHS
Ts-PEG-Ts
Valeric Acid-PEG-Valeric Acid
VA-PEG-VA
VA-PEG-VA-20K
VA-PEG-VA-5000
VA-PEG-Valeric Acid
Y-2-NHS-40K
Y-ALD-40K
Y-H-MAL-40K
Y-MAL-40K
Y-NHS-40K
Y-O-NHS-40K
Y-P-MAL-40K
Y型聚乙二醇NHS酯
Y型聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
Y型聚乙二醇氨基
Y型聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯
Y型聚乙二醇赖氨酸-NS
Y型聚乙二醇马来酰亚胺
Y型聚乙二醇乙醛
氨基聚乙二醇叠氮钠
胺基聚乙二醇-Boc-胺基
胺基聚乙二醇胺基
胺基聚乙二醇硅烷
胺基聚乙二醇硫醇
胺基聚乙二醇羧基
胺基聚乙二醇戊酸
八聚乙二醇
半乳糖聚乙二醇NHS酯
半乳糖聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
丙烯酸酯聚乙二醇丙烯酸酯
丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰亚胺
丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰亚胺戊酸酯
丙烯酸酯聚乙二醇马来酰亚胺
单甲氧基八聚乙二醇
单甲氧基九聚乙二醇
单甲氧基聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
单甲氧基聚乙二醇PP马来酰亚胺
单甲氧基聚乙二醇Texas Red荧光染料
单甲氧基聚乙二醇氨甲基
单甲氧基聚乙二醇胺基
单甲氧基聚乙二醇丙醛
单甲氧基聚乙二醇丙酸
单甲氧基聚乙二醇丙烯酸酯
单甲氧基聚乙二醇丹磺酰
单甲氧基聚乙二醇叠氮
单甲氧基聚乙二醇叠氮钠
单甲氧基聚乙二醇丁醛
单甲氧基聚乙二醇对甲苯磺酸
单甲氧基聚乙二醇对甲苯磺酰基
单甲氧基聚乙二醇对硝基苯酚碳酸酯
单甲氧基聚乙二醇二硫
单甲氧基聚乙二醇二硫化正吡啶
单甲氧基聚乙二醇二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺
单甲氧基聚乙二醇硅烷
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丙酸酸酯
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丁二酸酯
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丁酸酯
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺琥珀酸酯
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺戊酸酯
单甲氧基聚乙二醇琥珀酰酯酸
单甲氧基聚乙二醇环氧丙烷
单甲氧基聚乙二醇甲磺酸
单甲氧基聚乙二醇硫醇
单甲氧基聚乙二醇罗丹明
单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺
单甲氧基聚乙二醇嵌段共聚L-谷氨酸钠
单甲氧基聚乙二醇嵌段共聚L-赖氨酸三氟乙酸
单甲氧基聚乙二醇嵌段共聚L-赖氨酸盐酸盐
单甲氧基聚乙二醇嵌段共聚L-天冬氨酸钠
单甲氧基聚乙二醇羟基
单甲氧基聚乙二醇巯基 (硫醇)
单甲氧基聚乙二醇生物素
单甲氧基聚乙二醇羧基
单甲氧基聚乙二醇羰基咪唑
单甲氧基聚乙二醇酰肼
单甲氧基聚乙二醇硝苯基碳酸盐
单甲氧基聚乙二醇溴
单甲氧基聚乙二醇乙醛
单甲氧基聚乙二醇乙炔
单甲氧基聚乙二醇乙烯砜
单甲氧基聚乙二醇异氰酸酯
单甲氧基聚乙二醇荧光FITC
单甲氧基聚乙二醇荧光染料
单甲氧基六聚乙二醇
单甲氧基七聚乙二醇
单甲氧基十二聚乙二醇
单甲氧基十聚乙二醇
单甲氧基十一聚乙二醇
单甲氧基戊聚乙二醇
叠氮化聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯
叠氮化聚乙二醇胺基
叠氮化聚乙二醇羟基
叠氮化聚乙二醇生物素
叠氮化聚乙二醇羧基
叠氮聚乙二醇叠氮
丁二酸聚乙二醇丁二酸
丁醛聚乙二醇丁醛
对甲苯磺酸聚乙二醇对甲苯磺酸
多缩丙三醇二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺
二硫化正吡啶聚乙二醇N-羟基琥珀酰亚胺酯
二硫化正吡啶聚乙二醇二硫化正吡啶
二十八聚乙二醇
二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺聚乙二醇氨基
二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺聚乙二醇琥珀酰亚胺
二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺聚乙二醇马来酰亚胺
二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺聚乙二醇生物素
二硬脂酰甘油磷脂乙醇二硫化正吡啶
二硬脂酰甘油磷脂乙醇羧基
硅烷聚乙二醇胺基
硅烷聚乙二醇硅烷
琥珀酰亚胺丁二酸酯聚乙二醇琥珀酰亚胺丁二酸酯
琥珀酰亚胺聚乙二醇琥珀酰亚胺
琥珀酰亚胺碳酸酯聚乙二醇羧基
琥珀酰亚胺碳酸酯聚乙二醇羧基(甲酯)
琥珀酰亚胺戊二酸酯聚乙二醇琥珀酰亚胺戊二酸酯
环氧丙烷聚乙二醇环氧丙烷
甲磺酸聚乙二醇甲磺酸
甲基丙烯酸聚乙二醇甲基丙烯酸
甲氧基聚乙二醇丙醛
甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺
甲氧基聚乙二醇巯酯
甲氧基聚乙二醇碳酸酯
甲氧基聚乙二醇乙酸酯
九聚乙二醇
聚L-谷氨酸钠
聚L-赖氨酸三氟乙酸
聚L-赖氨酸盐酸盐
聚L-天冬氨酸钠
聚乳酸-聚乙二醇单甲醚共聚物
聚乙二醇单月桂酸酯
聚乙二醇二苯甲酸酯
聚乙二醇二甲醚
聚乙二醇和聚ε-己内酯的嵌段共聚物
聚乙二醇和聚苯乙烯的嵌段共聚物
聚乙二醇和聚丙烯腈的嵌段共聚物
聚乙二醇和聚甲基丙烯酸甲酯的嵌段共聚物
聚乙二醇和聚异戊二烯的嵌段共聚物
聚乙二醇失水山梨醇六油酸酯
聚乙二醇失水山梨醇四油酸酯
硫醇聚乙二醇硫醇
硫醇聚乙二醇羧基
六聚乙二醇
罗丹明B聚乙二醇氨基
马来酰亚胺聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
马来酰亚胺聚乙二醇胺基
马来酰亚胺聚乙二醇硅烷
马来酰亚胺聚乙二醇琥珀酰亚胺
马来酰亚胺聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯
马来酰亚胺聚乙二醇琥珀酰亚胺戊酸酯
马来酰亚胺聚乙二醇马来酰亚胺
马来酰亚胺聚乙二醇羧基
葡萄糖聚乙二醇NHS酯
葡萄糖聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
七聚乙二醇
羟基聚乙二醇-tBu-Propionate
羟基聚乙二醇胺基
羟基聚乙二醇对甲苯磺酸
羟基聚乙二醇马来酰亚胺
羟基聚乙二醇羟基
羟基聚乙二醇羧基
羟基聚乙二醇乙醛
巯基聚乙二醇胺基 (硫醇)
巯基聚乙二醇硅烷 (硫醇)
巯基聚乙二醇羟基 (硫醇)
巯基聚乙二醇巯基 (硫醇)
巯基聚乙二醇生物素
巯基聚乙二醇羧基 (硫醇)
生物素聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯
生物素聚乙二醇胺基
生物素聚乙二醇二硫
生物素聚乙二醇硅烷
生物素聚乙二醇琥珀酰亚胺
生物素聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯
生物素聚乙二醇琥珀酰亚胺戊酸酯
生物素聚乙二醇马来酰亚胺
生物素聚乙二醇生物素
生物素聚乙二醇羧基
生物素聚乙二醇荧光素
十二聚乙二醇
十聚乙二醇
梳狀聚乙二醇二硬脂酰甘油磷脂乙醇胺
羧基聚乙二醇Fmoc-胺基
羧基聚乙二醇二硫
羧基聚乙二醇硅烷
羧基聚乙二醇琥珀酰亚胺
羧基聚乙二醇硫醇
羧基聚乙二醇羧基
羧基戊基琥珀酰亚胺聚乙二醇羧基戊基琥珀酰亚胺
羰基咪唑聚乙二醇羰基咪唑
戊二酸聚乙二醇戊二酸
戊聚乙二醇
戊酸聚乙二醇戊酸
酰肼聚乙二醇酰肼
硝苯基碳酸盐聚乙二醇硝苯基碳酸盐
溴聚乙二醇溴
乙醛聚乙二醇乙醛
乙酸聚乙二醇乙酸
异氰酸酯聚乙二醇异氰酸酯
荧光素聚乙二醇N-羟基琥珀酰亚胺酯
荧光素聚乙二醇氨基
荧光素聚乙二醇琥珀酰亚胺
荧光素聚乙二醇琥珀酰亚胺戊酸酯
荧光素聚乙二醇马来酰亚胺
荧光素聚乙二醇羧基
正吡啶二硫化聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
正吡啶二硫化聚乙二醇琥珀酰亚胺
正吡啶二硫化聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯
正吡啶二硫化聚乙二醇琥珀酰亚胺戊酸酯
正吡啶二硫化聚乙二醇羧基

Labnet品牌代理商

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1. Labnet品牌介绍
美国莱伯特(Labnet)公司成立于1984年,是专业的实验室常规仪器制造商,以提供高品质、实用的生命科学产品为使命。20年来,莱伯特专注并坚持自己的使命,不断提高产品质量、增加新
产品,同时不断完善服务体系,形成了良好的售前、售中、售后服务体系。 主要产品有离心机、移液器、烘箱、培养箱、三维脱色摇床,电泳仪,凝胶成像系统等,产品畅销欧美各国。
2. Labnet重点产品
主要产品有离心机、移液器、烘箱、培养箱、三维脱色摇床,电泳仪,凝胶成像系统等,产品畅销欧美各国。
3. Labnet官网
www.labnet.com
4. 金畔生物代理Labnet品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
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Abcam品牌代理商

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1. Abcam品牌介绍
Abcam 位于英国的剑桥科学园,成立于1998年,专门生产和分销研究型抗体。我们的在线目录 (www.abcam.cn) 已有超过120,000 种抗体和试剂,并不断添加,供应予全球百多个国家。Abcam 于2005年11月在伦敦证券交易所上市,在美国、日本、香港、中国均设有分公司。
2. Abcam重点产品
生产和分销研究型抗体
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Life Technologies–上海金畔

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1. Life Technologies品牌介绍
Life Technologies作为Thermo Fisher Scientific旗下的品牌,Life Technologies信奉科
学在生活质量转化方面的力量。为对全球各地的科研人员提供支持,我们将为您提供优质、
创新的生命科学解决方案——从日常的必需品到配套的仪器服务一应俱全,满足您一切实验
室需求。主要的产品包括生命科学产品、临床诊断产品和应用科学。
生命科学产品包括
· 细胞分析
· 细胞培养
· PCR
· 测序
· 合成生物学
临床诊断产品包括
· 临床与转化研究
· 诊断开发
· 分子诊断
· 公共健康
应用科学产品包括
· 人身份诊断
· 食品安全
· 动物健康
· 生物生产
2. Life Technologies重点产品
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3. Life Technologies官网
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实验七 SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定

实验七 SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定

一、实验目的与原理
蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而消除了蛋白质原有的电荷差别,使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量,而与蛋白质所带的电荷无关,在一定条件下,蛋白质的分子量的对数与电泳迁移率间呈负相关。
本实验的目的是对多酚氧化酶的纯化度鉴定及分子量的测定,通过实验,学习和掌握SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法蛋白质纯度和分子量的鉴定。
二、仪器与试剂
1.材料:
硫酸铵盐析沉淀的多酚氧化酶粗酶样品、DEAE-纤维素DE52柱层析的样品,Sephadex G-100柱层析的样品。
2.试剂:
(1)丙稀酰胺(Acr母液):30%Acr (Acr/Bis)
(2)10%的SDS溶液
(3)10%的过硫酸铵溶液
(4)四甲基乙二胺(TEMED)
(5)分离胶缓冲液:1.5M Tris,PH8.8
(6)浓缩胶缓冲液:1.0M Tris,PH6.8
(7)电极缓冲液:10×30g Tris,125g 甘氨酸和5g SDS,加水溶解定容至1000ml,pH8.3
(8)样品缓冲液:0.2M Tris,PH6.8,1%SDS,30%甘油,巯基乙醇及溴酚兰
(9)染色液:0.15%考马斯亮蓝R250,溶于脱色液
(10)脱色液:50%的甲醇,7%的冰醋酸的水溶液
(11)标准分子量蛋白。
3.仪器设备:
电泳仪,垂直电泳槽等。
三、操作步骤
1, 凝胶制备:
用两块电泳玻璃板制成垂直板槽(不能漏胶),垂直放置。将配制好的分离胶溶液,倒入,滴加入无离子水,待凝胶聚集后,倒出无离子水,用吸水纸吸干,倒入浓缩胶,再插入梳子。
2, 上样:
分别取样品若干ml于离心管中,按1/1-1/5比例加入5×样品缓冲液,再沸水浴中加热3-5min,取出待用。用微量注射器分别吸取不超过30ul不同浓度的标准蛋白样品和试验样品注入样品槽。点样结束后,调节电泳仪电流到10mA(2-3mA/em),保持电流稳定不变,当溴酚蓝迁移到离分离胶底1-2cm时,即可停止电泳。
3, 染色:
电泳完毕后,取出凝胶板,浸入染色液中,在37℃温箱中保温过夜。倒掉染色液,24h后,即可看到清晰的蛋白质条带。
四、结果 (略)
五、注意事项
1、 SDS与蛋白质的结合按质量成比例(即:1.4gSDS/g蛋白质),如果比例不当,就不能得到准确的数据。
2、 用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子量时,必须同时作标准曲线。不能利用这次的标准曲线作为下次用。
3、 有些蛋白质由亚基(如血红蛋白)或两条以上肽链(α-胰凝乳蛋白酶)组成的,它们在巯基乙醇和SDS的作用下解离成亚基或多条单肽链。因此,对于这一类蛋白质,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定的只是它们的亚基或是单条肽链的相对分子量。
4、 有的蛋白质(如:电荷异常或结构异常的蛋白质;带有较大辅基的蛋白质)不能采用该法测相对分子量。
5、 如果该电泳中出现拖尾、染色带的背景不清晰等现象,可能是SDS不纯引起。
实验八 Western bloting 技术
一、实验目的与原理
Western bloting技术是用来检测蛋白表达的特定的灵敏的方法,由蛋白质的SDS-PAGE、电转及杂交几部分组成。杂交技术主要有NC膜封闭,靶蛋白与第一抗体的反应,结合靶蛋白的一抗和二抗的反应,显色等组成。将凝胶上的蛋白质转移到NC膜上,用其他蛋白作为封闭液,将膜上余下的其他蛋白结合位点封闭,加入与检测蛋白特异性的第一抗体,经免疫反应,一抗与靶蛋白结合,经洗膜液洗涤后,膜上仅在靶蛋白上结合抗体。在加入与第一抗体有免疫特异性的二抗,使之与一抗反应,反应后,经洗膜液洗涤,二抗仅存在于结合靶蛋白的一抗上。因为这种二抗都为酶标抗体,通过酶标反应,在显色液中,膜上结合靶蛋白—一抗—二抗的位置即将呈现一定的颜色。
二、材料与方法
1.材料
从微生物细胞中提取的多酚氧化酶(PPO):10μl,20μl
NC膜:硝酸纤维素膜
2.仪器:
电转移槽,电泳仪,塑料封口机,摇床
3.试剂:
转移缓冲液:48Mm Tris,39mM甘氨酸,0.037%SDS同时加入20%乙醇。
封闭液与稀释液:PBS(牛血清白蛋白)
辣根过氧化物酶显色液:现配现用
三、操作步骤
1.SDS-PAGE电泳见上个实验
2.电转
⑴剪NC膜大小、滤纸与凝胶板一致,浸泡在转移缓冲液中5min。
⑵在转移装置中依次将三层滤纸、凝胶、滤纸、三层滤纸放在一起。
⑶将装好的转移装置放入电转移槽中NC膜一侧向正极,凝胶一面向负极。
⑷接通电源电压63V,电流90mA,转移过夜。
⑸转移结束后,取出装置,依次取掉各层,用铅笔在膜的上沿做标记,切下其中一个孔所对应膜的一半。
⑹NC膜的封闭:将NC膜放入一塑料袋中,加入封闭液3ml,封口,轻轻震荡2h。
⑺将封闭好的NC膜放入另一塑料袋中,加入用封闭液稀释的一抗,2.8ml,封口。4℃下轻摇2h。
⑻洗膜:弃去反应液,用一抗稀释液洗三次,每次10min。
将膜从PBS中取出转至150mM氯化钠,50mM Tris-HCL(pH7.5)溶液中轻轻震荡10min。
⑼将二抗用二抗稀释液稀释,将NC膜放入塑料袋中,加入二抗溶液2.8ml。封口,轻轻震荡1h。
⑽洗膜:取出膜转至150mM氯化钠,50mM Tris-HCL(pH7.5)溶液中轻轻震荡10min,三次。
⑾将膜放入显色液中,室温轻轻摇动,10min。
⑿待条带出现后,立刻用水洗膜,然后转入PBS中,观察记录。
实验九 等电聚焦电泳(IEF)分离蛋白及测定蛋白质等电点
一、原理
等电点聚焦(IEF)是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展,等电聚焦是在稳定的pH梯度中按等电点的不同分离两性大分子的平衡电泳方法。
在电场中充有两性载体和抗对流介质,当加上电场后,由于两性载体移动的结果,在两极间逐步建立稳定的pH梯度,当蛋白质分子或其他两性分子存在于这样的pH梯度中时,这种分子便会由于其表面电荷在此电场中运动,并最终达到一个使其表面静电荷为0的区带,这时的pH则是该分子的pI,聚焦在等电点的分子也会不断扩散,一旦偏离其等电点后,由于pH环境的改变,分子又立即得到正电荷或负电荷,从而又向pI迁移。因此,这些分子总会是处于不断扩散和抗扩散的平衡中,在pI处得以“聚焦”.
二、仪器与试剂
1.材料:蛋白样品
2.试剂:
聚丙烯酰胺、甲乙聚丙烯酰胺、两性电解质、尿素、NP-40、teiton-100
电极液:1M磷酸(阳极液)、1M氢氧化钠(阴极液)
固定液:100g三氯乙酸、10g磺基水杨酸溶于500ml,定容为1000ml
染色液:0.35g考马斯亮蓝R-150溶于300ml脱色液中,加热到60-70℃,加入0.3g硫酸铜。
脱色液:25%乙醇、8%冰乙酸溶于水
样品缓冲液:1%Ampholine 、2%Triton X-100、9M尿素
三、操作步骤:
1, 样品制备:
用IEF样品缓冲液提取待分析样品,如其他缓冲液提取的样品则应透析后,冷冻干燥、再复溶于IEF样品缓冲液。充分溶解后,离心去除不溶杂质。
2,制模具:
洗干净两块IEF专用玻璃板,进行硅化和反硅化处理,两块玻璃板的硅化和反硅化面相对,放上夹条,夹子夹好。
3, 配胶:
胶液组成:6ml胶母液(10%,19/1)
6-8%尿素
1ml Ampholine (pH3.5-10)
60-80ul 10%AP
5 ul TEMED
4, 灌胶:配好的胶迅速灌入模具
5, 电泳:
等胶凝固后,小心揭去上下玻璃板,将塑料垫片底部擦干,小心放于电泳槽上。在胶面两边各放一根浸透电极缓冲液的电极条。在胶面上任意位置上放上小擦镜纸片,在纸片上加样,盖上盖子,横功率25W电泳,约10min后,暂停电泳,取下纸片,继续电泳约30min,待电流达4mA以下,停止电泳。
6, 表面电极测定蛋白质的pI
7, 固定:取出塑料片,放入固定液中15min
8, 染色:取出塑料片放入染色液中65℃染色,直至条带出现
9, 可脱色至背景消除后干燥保存。
四、结果 (略)
五、注意事项
1、 两性电解质是等电聚焦的关键试剂,它的含量2﹪-3﹪较合适,能形成较好的pH梯度。
2、 丙烯酰胺最好是经过重结晶的。
3、 过硫酸铵一定要新配置。
4、 所有水用重蒸水。
5、 样品必须无离子,否则电泳时样品带可能走歪,拖带或根本不成带。
6、 平板等电聚焦电泳的胶很薄,当电流稳定在8mA,电压上升到550V 以上,由于阴极飘移,造成局部电流过大,胶承受不了而被烧断。
核酸技术
实验十 染色体DNA的提取
一、实验目的与原理
DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息(bioinformation)(bioinformation)(bioinformation)(bioinformation)分子,是分子生物学研究的主要对象。DNA的提取是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作。本实验通过植物样品在液氮下研磨以粉碎组织,通过裂解液裂解细胞,有机溶剂反复抽提,使DNA进入水相与蛋白质成分分开,在RNase作用下,降解RNA以纯化DNA。
二、材料以方法
1、 材料:培养菌体
2、 仪器设备:超净工作台,培养箱,摇床,恒温水浴锅,高速冷冻离心机,台式离心机,移液枪一套,低温冰箱,冷冻真空干燥机,电泳仪,水平电泳槽,紫外观测仪
3、 试剂:
细胞裂解液 100 mM Tris-HCl
5 mM EDTA
500 mM NaCl
1.25% SDS
PH 7.5
饱和酚,氯仿/异戊醇,酚/氯仿/异戊醇
无水乙醇,70%乙醇,异丙醇
3 M NaAc pH5.2, RNase,50×TE缓冲液,电泳载样缓冲液
三、操作步骤
(1) 培养菌体
(2) 加入10 ml裂解液,1/10体积酚,于65℃下20-30 min,然后加入等体积的氯仿,轻摇
(3) 12000-15000rpm离心15 min
(4) 取上淸液,加入等体积氯仿,轻摇,12000-15000rpm离心15 min
(5) 取上淸液,加入0.6倍体积冷异丙醇(-20℃)或2倍体积冷无水乙醇(-20℃)
(6) 加入1/10体积的3 M NaAc(pH5.2),置于室温下10 min
(7) 12000-15000rpm离心10 min
(8) 倒弃液体留下沉淀,用70%乙醇洗涤沉淀
(9) 加入2倍体积无水乙醇
(10) 12000-15000rpm离心10 min
(11) 倒弃液体留下沉淀,真空干燥
(12) 复溶于2 ml TE
(13) 加入RNase,65℃或37℃处理10-30 min
(14) 加等体积酚,酚/氯仿,氯仿各一次,12000-15000rpm离心10 min
(15) 取上淸液,加入0.6倍体积冷异丙醇(-20℃)或2倍体积冷无水乙醇(-20℃)
(16) 加入1/10体积的3 M NaAc(PH5.2),置于室温下10 min
(17) 12000-15000rpm离心10 min
(18) 倒弃液体留下沉淀,用70%乙醇洗涤沉淀
(19) 真空干燥沉淀
(20) 复溶于0.5-1.0 ml的TE或水中,分装成小体积,4℃或-20℃保存。
(21) 电泳检测提取DNA的质量
四、结果与分析
点样空,若发亮则说明有污染
超螺旋结构DNA,若条带有拖尾则
说明有破碎的DNA
少量未清除的RNA
五、注意事项
1、 重点防止DNA的损伤,包括各种物理、化学和机械损伤。
2、 干燥好的染色体DNA最好溶于去离子水,以备后面直接利用。如果用TE 缓冲液溶解,后面还需去离子。
3、 取上清时,如果上清液过少,可再加入少量水,重新离心,取上清,避免DNA损失过多。
实验十一 质粒DNA的提取与纯化
一、实验目的与原理
质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。提取质粒的基本步骤分为三步:①细菌的培养和质粒的扩增,②细菌菌体的裂解,③质粒DNA的纯化。本实验采取的菌体裂解方法为碱解法,质粒纯化方法为梯度离心法。
二、材料与试剂
1、材料:大肠杆菌(Escherichia coli)(Escherichia coli)(Escherichia coli)(Escherichia coli)
2、仪器:超净工作台,培养箱,摇床,恒温水浴锅,台式离心机,取液器一套,低温冰箱,冷冻真空干燥机,电泳仪,水平电泳槽,紫外观测仪
3、试剂:
Solution I 25 mM Tris-Hcl(pH7.4)
10 mM EDTA(pH8.0)
50 mM葡萄糖
高压灭菌,4℃保存
Solution II 0.2 M NaOH, 1%SDS 现配现用
Solution III 5 N KAc pH4.8
高压灭菌,4℃保存
3 M NaAc PH5.2, 高压灭菌,4℃保存。异丙醇,溶菌酶(8 mg/ml),酚/氯仿,无水乙醇,70%乙醇,LB培养基,电泳试剂
三、操作步骤
1、细菌繁殖
LB培养基,2 ml/20ml,37℃,200rpm,摇一摇,过夜
2、离心10 min,5000 rpm, 4℃;弃上淸液
3、沉淀(菌体细胞)预冷的TES缓冲液洗涤,离心10 min,5000 rpm, 4℃
加入预冷的1 ml Solution I,冰浴,10 min
4、重新悬浮,加入150 ul溶菌酶母液,室温放置5 min
5、加入1.2 ml Solution II, 冰浴,5 min
6、加入0.9 ml预冷乙酸钾,混匀,离心10 min,12000 rpm, 4℃
7、加入1.5 ml异丙醇,-20℃冰箱内放置15 min
8、离心10 min,12000 rpm, 4℃
9、取沉淀,悬于400 ul TE缓冲液中
10、加入40 ul,3 M NaAc
11、酚/氯仿,抽提,乙醇沉淀
12、离心10 min,12000 rpm, 4℃
13、取沉淀,冷冻干燥,再悬浮于50 ul TE缓冲液中。
14、电泳检测提取DNA的质量
三、结果与分析
超螺旋结构DNA
四、注意事项
在本实验中,如果不经过RNase处理,在电泳带中,RNA会呈现极亮的带,所以,建议使用RNase处理一下。离心时应注意转速不能太低,太低会导致质粒不纯;也不要太高,否则质粒不易溶解。电泳时应注意电压,电压太高或混有蛋白质杂质时电泳带容易产生偏离和拖尾。在DNA操作中应尽可能轻地操作(尤其是分别加入溶液Ⅱ、溶液Ⅲ轻轻摇),否则质粒容易断裂,从而在观察条带时出现许多杂带。无水乙醇可用于沉淀质粒,如果质粒量比较大的话,一般用异丙醇来沉淀。
实验十二 亚克隆技术
一、目的与原理
限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶,该类酶是体外剪切基因片段的重要工具。实验主要通过EcoR Ⅰ,Hind Ⅲ两种限制性内切酶对λ DNA的单切酶、双切酶及部分酶切的操作,掌握内切酶的实验操作技术。
二、材料与试剂
1.材料:λDNA
2.仪器:
离心机,恒温水浴,取液器,电泳仪,电泳槽,紫外观测仪
3.试剂
EcoRI及缓冲液,HindIII及缓冲液,λDNA,TAE缓冲液
三、操作步骤:
EcoRI、HindIII单酶切及部分酶切
取2只干净、灭菌新Eppendorf管,分别按下表加入
试剂 A(μl)
灭菌水 0
10×缓冲液 2
质粒 5
染色体DNA 12
EcoR I
1
HindIII
总体积 20
37℃保温1—2小时。保温结束后,分别加入0.5M(pH8.0)EDTA(使终浓度达到10mM)。加入6μl电泳加样缓冲液。
电泳。
EcoRI、HindIII双酶切
取1只干净、灭菌新Eppendorf管,按下表
加入试剂 体积(μl)
灭菌水 14
10×缓冲液 2
λDNA 2
EcoR I
1
HindIII
1
总体积 20
37℃保温1—2小时。保温结束后,分别加入0.5M( pH7.2)EDTA(使终浓度达到10mM)。加入6μl电泳加样缓冲液。电泳分析。
四、结果 (略)
五、注意事项
1、 酶的量不超过总体积的1﹪,以为酶的保存液中含有甘油,甘油太多会形成星活性,切下非目的片段。
2、 在加入模板DNA以前可加入少量BSA,减轻管壁对酶的吸附作用。
3、 如果用双酶切,必须注意分别提供各自的最适盐浓度。若两者可以用同种缓冲液,则可同时水解,否则低盐浓度的限制酶必须先用,随着调节盐浓度,再用高盐浓度的限制酶水解。也可在第一个酶切反应完成后,用等体积酚/氯仿(1:1)抽提,加0.1倍体积的3mol/LnaAc和2倍体积的无水乙醇,混匀后-20℃放置30分钟,离心,干燥并重新溶于缓冲液后进行第二个酶切反应。

 

DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献

DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献
上海金畔生物科技有限公司提供DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献
简单介绍
探讨硫酸葡聚糖钠(dextran sodium sulphate,DSS)诱导的小鼠肠炎模型病变结肠组织的谷胱甘肽(GSH)变化及其与病变组织分泌的Th1/Th2型细胞因子IFN-g,IL-4及黏膜损伤的关系
DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献  的详细介绍
DSS诱导小鼠实验性肠炎建模参考文献
GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用
张  静, 韩  英, 纪  欣, 王志红, 李虹义, 郑  力
张静, 中国人民解放军总医院军医进修学院  北京市  100853
韩英, 纪欣, 王志红, 李虹义, 郑力, 北京军区总医院消化内科  北京市  100700
张静, 女, 1973-05-02生, 河北保定人, 汉族. 1997年承德医学院本科毕业, 解放军总医院军医进修学院2002级硕士研究生, 主治医师, 主要从事炎症性肠病的发病及免疫机制等方面的研究.
北京市自然科学基金资助项目, No. 7042064
通讯作者: 韩英, 100853, 北京市东城区南门仓5号, 北京军区总医院消化内科.
电话: 010-66721009
收稿日期: 2005-04-11    接受日期: 2005-04-27
Roles of Glutathione in dextran sodium sulphate-induced colitis in mice
Jing Zhang, Ying Han, Xin Ji, Zhi-Hong Wang, Hong-Yi Li, Li Zheng
Jing Zhang, Postgraduate Medical School, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100853, China
Ying Han, Xin Ji, Zhi-Hong Wang, Hong-Yi Li, Li Zheng, Department of Gastroenterology, General Hospital of Beijing Military Command, Beijing 100700, China
Supported by the Natural Science Foundation of Beijing, China, No.7042064
Correspondence to: Dr. Ying Han, Department of Gastroenterology, General Hospital of Beijing Military Command, 5 Nanmencang, East District, Beijing 100700, China.
Received: 2005-04-11    Accepted: 2005-04-27
Abstract
AIM: To investigate the expression of glutathione (GSH) in dextran sodium sulphate(DSS)-induced colitic mucosa and its relationship with cytokine secretion as well as mucosal injury.
METHODS: BALB/c mice in DSS group (n = 10) were fed with 50 g/L DSS to induce experimental colitis and those in normal controls (n = 10) were fed with distilled water. All the mice were killed after 7 days. The pathological changes of the colonic tissues were examined while immunohi-stochemstry was performed with GSH1 antibody to determine the GSH expression. ELISA was used to detect the expression of IL-4 and IFN-g.
RESULTS: The manifestations of acute colitis such as weight decrease, diarrhea and bloody stool appeared in mice of DSS group. focal crypt lesionsPathologically, focal crypt distortion, granulocyte and macrophage invasion were observed. The level of GSH in DSS group was significantly lower than that in control group (20.6 vs 3.14±1.0, t = 3.95, P = 0.01), whereas the expression of IL-4 was marked higher (38.7±4.7 vs 28.7±6.7, t = 3.16, P = 0.009). The content of IFN-g was decreased in DSS group (P>0.05).
CONCLUSION: Low expression of GSH is related to the increase of IL-4, decrease of IFN-g and mucosal injury in DSS-induced colitis in mice.
Key Words: Glutathione; Dextran sodium sulphate; Colitis; Mice; IL-4; IFN-g; Mucosal injury
Zhang J, Han Y, Ji X, Wang ZH, Li HY, Zheng L. Roles of Glutathione in dextran sodium sulphate-induced colitis in mice. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi  2005;13(12):1400-1403
摘要
目的: 探讨硫酸葡聚糖钠(dextran sodium sulphate,DSS)诱导的小鼠肠炎模型病变结肠组织的谷胱甘肽(GSH)变化及其与病变组织分泌的Th1/Th2型细胞因子IFN-g,IL-4及黏膜损伤的关系.
方法: 实验组小鼠(n = 10)给予含50 g/L DSS的蒸馏水自由饮用7 d之后处死,分离出的病变结肠一部分评价其病理学改变并用GSH1抗体做免疫组化,另一部分结肠培养后检测其IL-4、IFN-g的表达.对照组小鼠(n = 10)给予蒸馏水自由饮用7 d之后处死.
结果: DSS诱导实验性肠炎小鼠口服50 g/L的DSS溶液7 d出现体重减轻、腹泻、血便等急性肠炎的表现.病理学切片HE染色发现小鼠病变结肠腺体结构紊乱,黏膜和黏膜下单核细胞和多核细胞浸润.DSS组病变肠段组织GSH表达较对照组明显减少(2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病变结肠分泌的IL-4明显升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01), IFN-g轻度降低(P>0.05).
结论: DSS诱导的实验性肠炎小鼠病变结肠组织GSH的减少与病变结肠组织分泌的细胞因子IL-4增加、IFN-g下降以及黏膜损伤相关.
关键词: 谷胱甘肽; 硫酸葡聚糖钠; 肠炎; 小鼠; IL-4; IFN-g;黏膜损伤
张静, 韩英, 纪欣, 王志红, 李虹义, 郑力. GSH在DSS诱导的小鼠实验性肠炎中的作用. 世界华人消化杂志  2005;13(12):1400-1403
http://www.wjgnet.com/1009-3079/13/1400.asp
0  引言
炎症性肠病炎(inflammatory bowel disease,IBD)是一组病因不明的慢性肠道炎症性疾病,包括了两种独立的疾病,溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s disease,CD).虽然IBD的发病机制尚不清楚,目前发现其病因学机制与免疫异常、遗传影响、以及环境因素有关.近年来的研究发现,反应性氧簇(reactive oxygen species,ROS)产生过量对IBD的发展起着重要的作用.胃肠道黏膜自身有一些抗氧化防御系统,可以通过中和连续生成的ROS抵消其损害的影响.在这些防御网络中,内生硫氢基团,主要是还原型谷胱甘肽(GSH),在一些动物模型中对胃肠道黏膜细胞保护抵抗氧化应激起着重要的作用[1-2].以往对抗氧化剂作用的大量研究中,已经报道了在IBD患者和实验性肠炎中包括GSH在内的抗氧化剂水平的降低[3-4],而对于DSS诱导的实验性肠炎病变组织GSH的变化及其与黏膜损伤及细胞因子分泌的关系尚不明确,本实验将对上述问题进行研究和分析.
1  材料和方法
1.1 材料 雄性BALB/c小鼠,5-6周龄,质量18-22 g;DSS(Sodium Dextran Sulfate 5000,Wako Pure Chemical Industries Ltd.大阪,日本和光纯药工业株式会社);HBSS(Hank’s balanced salt solution,Sigma公司);无酚红、无抗生素的RPMI 1640(HyClone,公司);complete medium RPMI 1640(Cambrex公司);LPS(脂多糖,Sigma公司);DTT(1,4-Dithiothretol,二硫基苏糖醇,Sigma公司);胎牛血清FBS(中国杭州江滨生物技术有限公司);小鼠IL-4、IFN-g检测试剂盒(Sigma公司);GSH1:山羊GSH抗体(Santa Cruz公司,sc-15087);山羊SP试剂盒(北京中杉生物试剂公司).
1.2 方法 取10只BALB/c小鼠,将DSS加入蒸馏水中配成50 g/L的DSS溶液,给小鼠自由饮用7 d,8 d处死.正常对照组小鼠10只给予蒸馏水自由饮用7 d,8 d处死.各组小鼠处死后,先将整段结肠取下,测量结肠长度,肉眼观察结肠的形态,充血、溃疡、糜烂程度和范围,计算质量减少率.取充血、糜烂最明显部位的肠段(环状、片状各1块,正常组取回盲部及近肛门部组织环状、片状各1块)于中性甲醛溶液小瓶送检病理.便血评分:便血评分将取病理后的肠段纵行切开,其血性内容物用0-3+标准评价:0:无出血,1+:结肠1/3出血,2+:结肠2/3出血,3+:整个结肠均有出血.肠道标本积分:炎症细胞的渗出评分标准:0分-黏膜固有层内有极少量炎症细胞,1分-黏膜固有层内有较多的炎症细胞或黏膜固有层内的炎症细胞增多,2分-炎症细胞扩散至黏膜下层,3分-全层均有炎症细胞渗出;组织损伤评分标准:0分-没有黏膜损坏,1分-不连续的淋巴上皮损坏,2分-表层黏膜糜烂,3分-广泛的黏膜破损并向肠壁深层结构扩展[5].
1.2.1 病变组织GSH的表达 应用山羊GSH1抗对病变组织切片进行免疫组化分析,并根据阳性强度及阳性率评分的半定量标准.阳性强度评分标准:0分:(-),1分:(+),2分:(++),3分(+++).阳性率评分标准:0分:<10%,1分:10-25%,2分:26-50%,3分:>50%.总分为0-6分.
1.2.2 病变组织产生细胞因子的测定 将肠道病变组织标本置于含10 mmol/L DTT的HBSS中静置15 min,而后用RPMI1640液清洗肠段2次以除去DTT,在六孔培养板中加入含100 mL/L FBS 1 mL的RPMI1640共2 mL,置于CO2孵育箱内培养24 h,然后收集池内培养液,分装在3个eppindofe管中,-30℃冻存.应用小鼠IL-4,IFN-g检测试剂盒(ELISA法)测定IL-4,IFN-g.
统计学处理 应用STATA 7.0软件进行统计学处理,先用F检验,验证方差齐性,再进行t检验,P<0.05为差异有显著性.
2  结果
2.1 临床症状及病理学评价 BALB/c小鼠口服50 g/L的DSS溶液7 d成功诱导出急性肠炎,表现为体重减轻、腹泻、血便等.病理学切片HE染色发现小鼠左半结肠较右半结肠为重,结肠腺体结构紊乱,黏膜及黏膜下单核细胞和多核细胞浸润等.质量:DSS组小鼠体重下降而正常对照组体重增加(-0.7±0.8 g vs 2.4±0.9 g,t = -7.47,P = 0<0.001).血便:正常对照组小鼠结肠处死后结肠切开未发现血便,而DSS诱导组6只小鼠结肠发现血便(0.7±0.5 vs 0,t = 4.42,P = 0.003<0.001).结肠缩短:DSS诱导肠炎组小鼠与正常对照组小鼠比较,结肠有明显的充血,水肿,溃疡形成及长度缩短(9.2±0.6 vs 10.4±0.8,t = -3.72,P = 0.0 017 <0.01).病理评分:结肠病理切片HE染色发现,DSS诱导的实验性肠炎组小鼠的结肠局部腺体结构紊乱,黏膜及黏膜下中性粒细胞及单核细胞和多核细胞等炎性细胞浸润,黏膜局部糜烂,部分隐窝破坏,而对照组小鼠未发现上述变化(3.0±0.5 vs 0.4±0.7,t = -8.18,P = 0<0.001,图1).
2.2 小鼠结肠病变组织GSH表达 应用山羊GSH1抗对病变组织切片进行免疫组化分析,发现GSH主要表达在黏膜表面及腺体细胞的胞质内.通过半定量标准评分,发现DSS诱导实验性肠炎小鼠的病变肠段组织GSH表达明显低于对照组 (2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95,P = 0.01<0.05,图2).
2.3 小鼠病变结肠分泌的IFN-g及IL-4 DSS组病变肠段分泌的Th2细胞因子IL-4 显著高于对照组(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16,P = 0.009<0.05);DSS组病变肠段分泌的Th1细胞因子IFN-g较对照组减少但差别无显著性(20.6±7.4 vs 23.2±5.6,t = -0.70,P = 0.50>0.05).由于DSS组IL-4显著升高,同时IFN-g下降,致IL-4/IFN-g升高,显著高于对照组(1.88,1.24).
图1  对照组和实验组小鼠结肠组织的病理变化(HE×200). A: 对照组; B: 实验组.
图2  对照组和实验组小鼠结肠组织GSH的表达(×100). A: 对照组; B: 实验组.
3  讨论
DSS诱导的BALB/c小鼠急性实验性肠炎模型表现为体重减轻,腹泻,血便等.病理学检查发现小鼠左半结肠病变较右半结肠为重,结肠黏膜腺体结构紊乱,单核细胞和多核细胞浸润,黏膜局部糜烂,部分隐窝破坏等[6-7].IBD患者的胃肠道炎症中渗透的大量炎症细胞包括巨噬细胞和中性粒细胞等通过产生反应性氧簇(reactive oxygen species,ROS)而将炎症肠道暴露于氧化应激中.而胃肠道黏膜自身有一些抗氧化防御系统,可以通过中和连续生成的ROS抵消其损害的影响.在这些防御网络中,内生硫氢基团,主要是还原型谷胱甘肽(GSH)起着重要的作用.GSH是一种包含一个巯基的非蛋白三肽,GSH大量存在于各种不同细胞中在多种生化过程中起着重要的作用.GSH构成细胞防御氧化损伤机制中的第一道防线,而且是普遍存在的细胞类型中的主要氧化还原缓冲剂.在其众多功能中,其含半胱氨酸的三肽可以减轻蛋白质的二硫化,减轻自由基和内毒素的毒性作用,并维持细胞内氧化还原的平衡[8].Sido et al[4]的研究发现与健康对照组比较IBD患者半胱氨酸浓度明显减少,其减低水平与疾病临床活动指数相关,去蛋白血浆中总的巯基成分均明显减少,术后3 mo恢复到正常水平.Zea-Iriarte et al[9]发现在TNS(三硝基苯硫酸,trinitrobenzene sulphonic acid)诱导的实验性肠炎中,GSH浓度及谷胱甘肽硫基转移酶,Cu,Zn超氧化物歧化酶均减低,但是谷胱甘肽过氧化物酶却增加.我们的实验研究发现 DSS组病变肠段组织GSH表达明显低于对照组 (2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95,P = 0.01<0.05),与文献报告相似,说明GSH不足与IBD和实验性肠炎的炎症相关,削弱黏膜的抗氧化能力可能会促进肠道的氧化损伤.
Th1和Th2细胞因子反应类型对于小鼠炎症和感染的慢性化和侵袭性可产生影响,是慢性肠道炎症重要的决定因素.Th1/Th2型反应平衡是由分泌细胞因子的类型决定的.Th1型是以通过伴随抗原提呈细胞(APC)生成的IL-12而产生IFN-g为特征.Th2型则是以低IFN-g/高IL-4和低IFN-g/高IL-10为特征[10].本实验中DSS诱导的实验性肠炎小鼠病变肠段分泌的IL-4明显增加,IFN-g下降,致IL-4/IFN-g显著升高,说明DSS诱导的急性实验性肠炎是以Th2型免疫反应为主的炎性改变.Peterson et al[11]和Murata et al[12]曾报道鼠的抗原提呈细胞(APC)或腹腔定居的巨噬细胞中GSH的损耗可使IL-12的分泌减少并导致典型的Th1细胞因子形式向Th2反应模式转化.Peterson et al[11]的研究还显示应用GSH损耗或补充药物时巨噬细胞内GSH的水平可以影响Th1/Th2细胞因子的倾向.且将来源于GSH损耗小鼠的T细胞与未处理的BALB/C鼠的巨噬细胞一起培养可产生正常量的IFN-g,因此IFN-g产量减少是由于巨噬细胞而不是T细胞中GSH损耗造成的.另外Jeannin et al[13]在研究易于产生IL-4的培养细胞系统中发现在培养液中增加GSH的水平可使IL-4的产量以量效依赖的方式减低.这些研究结果充分表明巨噬细胞内的GSH水平对于调节在免疫反应中向Th1或Th2细胞因子反应的发展趋势具有重要的作用.
总之,本研究结果显示DSS诱导的急性实验性肠炎小鼠病变结肠的组织GSH的减少与病变结肠组织分泌的细胞因子IL-4增加、IFN-g减低及结肠黏膜损伤有相关性,但是其机理不明.GSH的表达有可能影响不同类型炎性细胞因子的分泌进而影响黏膜组织的损伤.同时提示肠道黏膜免疫异常在IBD发病机制中的作用不容忽视,特别是巨噬细胞中的GSH的变化是否与黏膜炎症损伤及Th1/Th2细胞因子分泌的相关性有待于探讨.
4    参考文献
1    Goldin E, Ardite E, Elizalde JI, Odriozola A, Panes J, Pique JM, Fernandez-Checa JC. Gastric mucosal damage
in experimental diabetes in rats: role of endogenous glutathione. Gastroenterology  1997;112:855-863
2    Takeuchi K, Okada M, Ueshima K, Ohuchi T, Okabe S. Endogenous sulfhydryls in healing gastric mucosal
injury induced by HCl in the rat. Digestion  1993;54:91-97
3    Holmes EW, Yong SL, Eiznhamer D, Keshavarzian A. Glutathione content of colonic mucosa: evidence for oxidative
damage in active ulcerative colitis. Dig Dis Sci  1998;43:1088-1095
4    Sido B, Hack V, Hochlehnert A, Lipps H, Herfarth C, Droge W. Impairment of intestinal glutathione synthesis in patients
with inflammatory bowel disease. Gut  1998;42:485-492
5    Loher F, Schmall K, Freytag P, Landauer N, Hallwachs R, Bauer C, Siegmund B, Rieder F, Lehr HA, Dauer M, Kapp
JF, Endres S, Eigler A. The specific type-4 phosphodiesterase inhibitor mesopram alleviates experimental colitis in mice.
J Pharmacol Exp Ther  2003;305:549-556
6    Konrad A, Mahler M, Flogerzi B, Kalousek MB, Lange J, Varga L, Seibold F. Amelioration of murine colitis by feeding
a solution of lysed Escherichia coli. Scand J Gastroenterol  2003;38:172-179
7    Villegas I, Alarcon de la Lastra C, Orjales A, La Casa C. A new flavonoid derivative, dosmalfate, attenuates
the development of dextran sulphate sodium-induced colitis in mice. Int Immunopharmacol  2003;3:1731-1741
8    Murata Y, Amao M, Yoneda J, Hamuro J. Intracellular thiol redox status of macrophages directs the Th1 skewing
in thioredoxin transgenic mice during aging. Mol Immunol  2002;38:747-757
9    Zea-Iriarte WL, Makiyama K, Goto S, Murase K, Urata Y, Sekine I, Hara K, Kondo T. Impairment of antioxidants in
colonic epithelial cells isolated from trinitrobenzene sulphonic acid-induced colitis rats. Protective effect of
rebamipide. Scand J Gastroenterol  1996;31:985-992
10    Romagnani P, Annunziato F, Piccinni MP, Maggi E, Romagnani S. Th1/Th2 cells, their associated molecules and role
in pathophysiology. Eur Cytokine Netw  2000;11:510-511
11    Peterson JD, Herzenberg LA, Vasquez K, Waltenbaugh C. Glutathione levels in antigen-presenting cells modulate
Th1 versus Th2 response patterns. Proc Natl Acad Sci USA  1998;95:3071-3076
12    Murata Y, Ohteki T, Koyasu S, Hamuro J. IFN-gamma and pro-inflammatory cytokine production by
antigen-presenting cells is dictated by intracellular thiol redox status regulated by oxygen tension. Eur J
Immunol  2002;32:2866-2873
13    Jeannin P, Delneste Y, Aubry JP, Lecoanet-Henchoz S, Gauchat JF, Life P, Bonnefoy JY. Thiols decrease human
IL-4 production and IL-4-induced immunoglobulin synthesis. Int Arch Allergy Immunol  1997;113:329-330
免责声明:此文献仅用来做实验参考。
上海金畔生物可以提供供大鼠、小鼠等的肠炎造模产品——硫酸葡聚糖5000(国内文献多使用),硫酸葡聚糖36000-50000(国际文献多使用),TNBS(灌肠实验,美国文献较常见)。其中硫酸葡聚糖造模时采用自由饮用的给药方式较常见,且操作简单,实验结果明显。
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标准品、材料和服务不断增长的需求,Chromadex 公司在1999年应运而生。随着各种消费类产品的出现,越来越多的消费者和政府机构要求有质量保证的研究方法,
如今Chromadex公司采取以科学严谨性为支撑的消费者为中心的方式,在参考标准品这服务性行业中处于领先地位。它在市面上的专业技术赋予它独特的基础,使它可以结合科学健康的自
然力量去开发和销售天然和新颖的配料。
2. ChromaDex重点产品
植物化学/中草药对照品
3. ChromaDex官网
http://https://chromadex.com/default.aspx
4. 金畔生物代理ChromaDex品牌联系方式
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Axygen品牌代理商

Axygen品牌代理商–上海金畔
1. Axygen品牌介绍
美国Axygen公司是一家位于硅谷地区的高科技企业,主要产品为实验室耗材,包括:吸头、PCR薄壁管、PCR板、PCR封口膜、离心管、离心管架和分离柱。
2. Axygen重点产品
主要产品为实验室耗材,包括:吸头、PCR薄壁管、PCR板、PCR封口膜、离心管、离心管架和分离柱。
3. Axygen官网
http://axygen.com/
4. 金畔生物代理Thermo Fisher Scientific品牌联系方式
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上海金畔生物科技有限公司提供 T细胞分离用尼龙毛柱

上海金畔生物科技有限公司提供 T细胞分离用尼龙毛柱

在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵,而且操作简便,所需要的条件也不高,是一种非常实用的方法。
首先要指出的是实验中所使用的是分离T细胞专用的尼龙毛(Nylon Fiber),不是化工上的尼龙纤维,曾经有人问过我这种问题,如果你买错了,可是做不出来的!
现在市面上有尼龙毛填料,也已经有了商品化的尼龙毛柱子,这两者的区别主要是以下两点:1.商品化的柱子的填料量是已经定好的,有一个确定的上样量范围。而自己买填料装柱可以控制填料量,也就是可以控制上样量,这对于样本量非常少,或是样本量非常大的实验需求非常合适。2.商品化的柱子已经经过了无菌处理(一般是辐射灭菌),而自己装柱当然就要自己灭菌了。
操作方法:
1.秤取1.5g尼龙毛装入20-30ml玻璃容器或注射器内(要可以灭菌的),填料的体积控制在15毫升左右(注射器上有标记,所以还是比较好控制的),因为尼龙毛的松紧关系到T细胞的回收率,所以要特别注意。注射器下端配接5厘米左右长的带有弹簧夹的橡皮管。
2. 加入大量的PBS平衡柱子后,用铝箔包裹,并置于适当的容器内,高压灭菌15分钟。
(商品化尼龙毛柱以上步骤可以省略,经过PBS平衡后可以直接进行下列步骤。)
3. 灭菌的尼龙毛柱垂直固定后放于超净台内,顶部以铝箔覆盖,避免污染。
4. 注射器下端,橡皮管,弹簧夹用无水酒精消毒。打开弹簧夹调节流速在大约3-4ml/min。
5.首先,加入3-4倍柱体的无血培养基平衡,之后加入相同体积的含有血清的培养基平衡(上述培养基都要预热),最后等培养基液面接近柱填料液面时,关闭弹簧夹。
6. 样本细胞悬浮液浓度控制在约5×108cells/ml,上样量一般是1/3-1/5柱体积。样品加入之后,再加入少量培养液,然后关闭弹簧夹。
7.覆盖铝箔,垂直固定,置于消毒过的容器中,于培养箱内37℃孵育1小时。此过程中柱子必须要保持垂直状态。
8. 从培养箱中拿出柱子,置于超净台内,除去铝箔。接上按照4.中的方法消毒的弹簧夹和橡皮管,加入适当体积经37℃预热的培养基,打开弹簧夹控制流速在3-4 mL/min,流出约5ml之后,流出的培养液基变得不透明,此时其中含有T细胞,收集这一部分培养基。
9. 基本上何时结束收集取决于流出液体中细胞的浓度,实际上,收集的量达到一个柱体积时就可以停止收集,因为即使收集更多的量,回收率几乎不会增加。
10 .上述操作后,实验结果如下:
细胞的回收率为: 15~20 %
T细胞含量: 85~95 %
B细胞污染率: 1 5 %
多数细胞被确定为T细胞。
(注)收集粘附于尼龙毛上的细胞时,将T细胞收集完毕后的尼龙毛再无菌操作的状态下取出,转移到适当的容器中,用镊子小心的将尼龙毛松开,粘附的细胞可以洗到培养基中。或者将注射器芯插入注射器内,通过压力使的粘附的细胞随着液体流出。
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