配方：纤溶酶在6%交联琼脂糖珠上，以50%的纯甘油浆提供。

配体密度：0.2mg/ml树脂。

应用：高效、方便地切割含有纤溶酶特异性切割位点的重组融合蛋白。

方案：为了找到一个目标蛋白的最佳切割条件，建议在小范围内进行初步的切割反应。与纤溶酶的成功切割依赖于靶蛋白的正确折叠，使酶能够进入纤溶酶识别序列。一旦达到目标酶切的最佳条件，就可以得到整个蛋白质裂解的最佳条件。在建立裂解反应之前，目标蛋白应纯化至均匀，并在50 mM Tris缓冲液、0.1 M NaCl、pH 7.4下透析。

1） 轻轻地旋转着珠子。不要涡流。

2） 将50µl悬浮液等分，并添加到1 mg Eppendorf管中的目标蛋白质中。目标蛋白的推荐浓度为1mg/ml。

3） 通过倒置试管（不要涡流）轻轻混合，并在37°C的旋转摇床上摇动

4） 以固定的时间间隔旋转试管，将试样等分并立即冷冻。反应结束后，用SDS-PAGE分析样品。

5） 为了避免过度卵裂，不要长时间孵化。

裂解目标蛋白的回收：

1） 融合蛋白完全裂解后，将反应混合物在1500 x g下旋转2-3分钟。

2） 去除上清液，并用0.2 ml 50 mM Tris缓冲液（pH 7.4）清洗珠子。

3） 重复步骤1和2以最大限度地回收目标蛋白及其裂解片段。进一步的层析可能需要从目标蛋白中去除裂解片段。

储存条件-20°C

装运条件凝胶包

仅供研究使用！不用于人类。