Blue-Berpharose FF
蓝色-琼脂糖凝胶FF是一种将活性蓝 3G键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,主要用于纯化白蛋白、干扰素、需要核苷酸辅助的酶、ɑ2-巨球蛋白凝血因子等。
2.规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、20ml、100ml、500ml、1L
3.产品性能
性能 | 指标 |
基质 | 6%琼脂糖微球 |
配基 | 活性蓝3G |
配基密度 | 7µmol/ml左右 |
载量 | ≥18 mg HSA /ml |
粒径 | 45-165μm |
推荐流速/最大流速 | 20-100/750 cm/h |
耐压 | 0.3 MPa, 3 bar |
pH稳定范围 | 3-11 |
储存缓冲液 | 20%乙醇 |
储存温度 | 4-8℃ |
- 纯化流程
应用举例:人血清白蛋白(HSA)的纯化
平衡缓冲液:50mM Na2HPO4、50mM 柠檬酸钠、pH7.0
结合缓冲液:50mM Na2HPO4、50mM 柠檬酸钠、pH7.0
洗脱缓冲液:50mM Na2HPO4、50mM 柠檬酸钠、1-2M NaCl、pH7.0
(注:结合液和洗脱液可根据样品性质进行适当改变,原则是低盐上样高盐洗脱)
- 平衡:用3-5个柱体积的平衡缓冲溶液进行平衡,观察检测器的变化,直到电导率、 pH值等参数不变。
- 上样:样品的预处理,样品需至少用0.45μm滤膜过滤,在上样,以免堵塞层析柱。上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可通过线性实验找到最佳上样量。
- 淋洗:用5-10个柱体积的平衡缓冲液进行淋洗,观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数基本不变。
(4)洗脱:使用 5-10 倍柱体积的洗脱液,收集洗脱峰。
(5)清洗保存:依次使用 3 倍柱体积的平衡缓冲液液和 5 倍柱体积的去离子水平衡填料,然后保存在等体积的20%乙醇中,置于 4-8 ℃保存。
5.在位清洗(CIP):
填料可以重复使用无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
(1)去除一些沉淀或变性物质:用 3-4 倍柱体积的0.1M NaOH,然后用3-4倍柱体积的70%乙醇或2M硫青酸钾溶液清洗,然后立即用5倍柱体积的结合液平衡。
(2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质:用 3-4 倍柱体积的70%乙醇或30%的异丙醇或1% Triton X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的结合液平衡。
- 注意事项:
(1)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
(2)本产品保存条件为20%乙醇,4-8℃。
(3)运输:4-25℃,常,避光。
(4)仅供科研实验使用。
参数信息 | |
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外观状态: | 固体或粉末 |
质量指标: | 95%+ |
溶解条件: | 有机溶剂/水 |
CAS号: | N/A |
分子量: | N/A |
储存条件: | -20℃避光保存 |
储存时间: | 1年 |
运输条件: | 室温2周 |
生产厂家: | 上海金畔生物科技有限公司 |