T7 RNA Polymerase，即T7 RNA聚合酶，是T7噬菌体DNA编码的酶，对T7启动子序列具有高度特异性 。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶，具有 5′→3′的RNA聚合酶活性，可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入，合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。
产品特点：
该酶对T7启动子具有高度特异性，不识别其它生物来源的启动子。可以识别修饰的核苷酸，例如生物素标记、荧光素标记、放射性同位素、地高辛标记dNTP，用于各种标记RNA的合成，进行下游实验。
质量保证：
1、SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，毛细管电泳检测纯度在95%以上；
2、酶动力学实时荧光法显示无DNA酶及RNA酶污染；
3、光度测定法显示内毒素含量≤10 EU/mg。
产品组成

品名	规格	产品组成
		10 x Transcription Buffer	Mg” (400 mM)	T7 RNA Polymerase (1 KU/jiL)
JP60153-50 KU	50 KU	150 μL	100μL	50 μL
JP60153-200 KU	200 KU	500 μL	500μL	200 μL
JP60153-1000 KU	1000 KU	1.25 mLx2	2 mL	1 mL

携带T7 RNA聚合酶基因的E. coli

≥90%

比活：1 KU/μL

【RNA体外转录合成】

1、在RNase free的离心管中加入右侧表格中各组分配制反应体系；
2、将上述反应液混合均匀，低速离心至管底，37℃孵育4 h。若转录本长度小于100 nt，增加反应时间至4~8 h；
3、转录后取样品进行凝胶电泳，取样1 μL稀释到5 uL，然后用1%的琼脂糖凝胶进行检测，以确定转录是否成功；
4、反应完成后，加入DNase Ⅰ（RNase free），37℃孵育30 min以去除模板DNA。

注：

（1）为了特定区域的有效转录，建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。
（2）反应体系于室温配置。由于10×Transcription Buffer 中含有亚精胺，低温下亚精胺浓度过高容易引起DNA模板沉淀，建议最后加入模板DNA。
（3）建议在PCR仪中进行反应，为防止蒸发，建议开启热盖功能。
（4）使用试剂、容器等无RNA酶污染。

-20 ℃以下保存。避免反复冻融或频繁暴露于温度变化中，首次使用时建议进行分装。产品有效期：12个月

 

存储缓冲液：50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，20 mM β-ME，1 mM EDTA，50% 甘油，0.1% (w/v) Triton X-100，pH 7.9

1、单链 RNA合成（包括mRNA、高特异性RNA探针、siRNA前体、gRNA前体等）；
2、合成的RNA可以用于或用作：杂交探针，基因组DNA序列分析，核糖核酸酶保护测定，反义RNA合成，作为 体外翻译的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、 miRNA等小RNA。

1、使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20 ℃保存；
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
3、产品仅供研究使用。

[1] Schenborn ET, Mierendorf RC Jr. A novel transcription property of SP6 and T7 RNA polymerases: dependence on template structure. Nucleic Acids Res. 1985;13(17):6223-6236. PMID: 2995921
[2] Davanloo P, Rosenberg AH, Dunn JJ, Studier FW. Cloning and expression of the gene for bacteriophage T7 RNA polymerase. Proc Natl Acad Sci U S A. 1984;81(7):2035-2039. PMID: 6371808
[3] Melton DA, Krieg PA, Rebagliati MR, Maniatis T, Zinn K, Green MR. Efficient in vitro synthesis of biologically active RNA and RNA hybridization probes from plasmids containing a bacteriophage SP6 promoter. Nucleic Acids Res. 1984;12(18):7035-7056.