PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)
PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)

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PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

培养物上清的外泌体定性·定量分析

◆特点


采用PS结合分子Tim4包被板

● 通过磷脂酰丝氨酸(PS)结合分子进行捕捉。※1

● 可检测出0.1μL培养上清液细胞外囊泡。

● 用纯化细胞外囊泡为标准品※2进行定量检测。

● 可通过WB法※3进行50~1,000倍高灵敏度检测。

↓↓

培养上清的细胞外囊泡高灵度定性·定量检测

※1比通过抗体包被板ELISA法能更好进行外囊泡的定性·定量分析。

※2请使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡标准品。

※3WB法:免疫印迹实验


最优化试剂盒

● 最优化对照用一抗※4

● 最优化检测用二抗※5

● 采用显色法

↓↓

操作简便,实验重复性高

※4附加抗人CD63抗体。检测其他表面标记蛋白可利用任意小鼠单抗。

※5附加抗小鼠IgG抗体-HRP标记。

 


◆测定原理·产品概述


  本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析,以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。将能与外囊泡表面的磷脂酰丝氨酸(PS)特异性结合的蛋白包被到板上,细胞外囊泡与其反应固定后,用任意外囊泡表面标记蛋白的小鼠单抗作为检测一抗,试剂盒的HRP标记小鼠IgG抗体为二抗,可高灵敏度检测表面具有任意标记蛋白的细胞外囊泡。另外,试剂盒含有作为控制组检测一抗的抗人CD63小鼠单抗,可检测出人CD63阳性外囊泡

  通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS(Code No.: 293-77601)提纯细胞培养上清和体液样品中的外囊泡,通过本试剂盒对细胞外囊泡的表面标记蛋白进行免疫印迹实验,可50~1,000倍高灵敏度且简便进行检测。另外,从细胞上清中利用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡作为标准品,可对细胞上清外囊泡进行定量分析。

PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)


◆试剂盒组成


试剂盒组成(96次)

包装

捕获外泌体96孔板

1个(8well×12strips)

反应/洗涤缓冲液(10×)

50mL×2瓶

外泌体结合增强子(100×)

10mL×1瓶

对照一抗Anti-CD63(100×)

120μL×1瓶

二抗HRP缀合抗小鼠IgG(100×)

120μL×1瓶

TMB溶液

12mL×1瓶

终止液

12mL×1瓶

封板膜

4个

说明书

1本

 

◆案例

各种细胞培养上清纯化外囊泡定性分析

  将各种细胞获得的纯化外囊泡1ng添加至板孔中,利用能检测表面标记蛋白CD9/CD63/CD81的一抗通过本试剂盒对各表面标记量进行定性比较。

  另外,作为比较参考数据,将各细胞纯化150ng外囊泡进行电泳,利用能检测表面标记的CD9/CD63/CD81的一抗对各表面标记蛋白量进行定性分析。


PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD) PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

ELISA系统和WB分析之间,已确认标记蛋白表达模式具有相关性!!

 

正常人血清纯化细胞外囊泡的定性分析

  将从正常人血清的6个样品纯化的细胞外囊泡,通过BCA检测外囊泡膜上的蛋白浓度。分别添加40、20、10ng到孔中,用可识别表面标记CD63的对照组检测一抗测定OD值进行定性比较。


PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

使用从体液样品纯化的细胞外囊泡具有良好的线性!!

 

细胞培养上清纯化细胞外囊泡的检测灵敏度参考数据

  COLO201细胞培养上清纯化外囊泡,比较本试剂盒和免疫印迹实验的检测灵敏度。


PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

免疫印迹实验和ELISA的检测灵敏度比较

  (a),(b)使用各种抗CD63抗体(其他公司产品,Wako产品:Code No. 012-27063)进行免疫印迹实验检测灵敏度数据

  样品:COLO201细胞培养上清纯化外囊泡(使用MagCapture Exosome Isolation Kit PS纯化)

  ★:各抗体免疫印迹实验的检测限。

  (c)Exosome ELISA Kit检测限数据

  用本试剂盒对COLO201细胞源纯化外囊泡(使用MagCapture Exosome Isolation Kit PS纯化)进行梯度稀释的样品以及缓冲液的空白值进行测定,制作COLO201标准曲线。利用此标准曲线可算出COLO201源纯化样品的最低检测灵敏度。(测定各浓度点n=6,空白点n=12)

  比免疫印迹实验可高灵敏度检测标记蛋白。


细胞培养上清样品的稀释线性(Linearity)参考数据

  COLOC201细胞培养上清纯化外囊泡为标准品制作标准曲线,以COLO201细胞培养上清5个梯度稀释样品(1:100-1:1600)进行稀释线性进行评估。


PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

COLO201细胞培养上清

CM量

(μL)

稀释

测定值

(ng/mL)

期望值

(ng/mL)

预期百分比

比率

稀释因子(×)

0.0625

1:1600

0.000625

0.89

0.91

98.4

0.125

1:800

0.00125

1.82

1.72

105.6

0.25

1:400

0.0025

3.44

3.52

97.8

0.5

1:200

0.005

7.04

6.78

103.9

1

1:100

0.01

13.6

  标准品:COLO201细胞源外泌体

  (使用MagCapture Exosome Isolation Kit PS纯化)

  测定样品:COLO201细胞培养上清

  一抗:试剂盒附带抗CD63抗体

  良好的稀释线性,已确认可检测0.1μL培养上清的细胞外囊泡。 

相关产品


  可代替超速离心法纯化标准高纯度细胞外囊泡。

产品编号

产品名称

保存

包装

293-77601

MagCapture 外泌体提取试剂盒PS

MagCapture Exosome   Isolation Kit PS

2-10℃

10次*1

  *1 所使用的磁珠可重复再利用4次。内附充足缓冲液。若同一样品反复提取及不会发生污染的情况下,最多可使用50次。


血清、血浆样本,或其他物种中外泌体直接ELISA,请点击:

PS Capture™外泌体ELISA Kit (链霉亲和素HRP)

更多应用说明,请点击:

新型亲和性外泌体纯化法与外泌体高灵敏度检测应用

欲了解相关产品请点击文字:

MagCapture 外泌体提取试剂盒

Wako外泌体相关抗体CD63单克隆抗体

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Wako 外泌体册子

PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

和光外泌体ELISA试剂盒宣传页

PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

和光外泌体ELISA试剂盒说明书


Q&A


Q1 标准品必须要制备吗?Wako的MagCapture Exosome Isolation Kit PS都必须使用吗?
A1 定量测定时,请制备外囊泡标准品。超速离心法和多聚体沉淀法等方法纯化的外囊泡也可作为标准品,但在测定时还是推荐PS亲和法纯化的外囊泡作为标准品。(详细请参考说明书)
Q2 为什么没有附带的标准品?
A2 每种细胞的表面标志蛋白质种类和含量存在差异,标准品和测定样品的来源细胞必须统一。因此本试剂盒未附加标准品,请制备与样品同一来源细胞培养上清的标准品。
Q3 血清、血浆样品可直接测定吗?
A3 因为本试剂盒附带的检测二抗显示与人,小鼠、大鼠IgG非特异性反应,不推荐人,小鼠、大鼠血清、血浆直接使用。但是,用MagCapture Exosome Isolation Kit PS从血清、血浆纯化外囊泡可定性分析,另外,超速离心法和多聚体沉淀法等方法纯化的外囊泡也可做定性分析。
Q4 细胞培养上清可直接测定吗?
A4 试剂盒附带的检测二抗不与牛IgG发生非特异性反应,不仅无血清培养基,而且FBS添加培养基的细胞培养上清也可直接测定。可定量和定性分析细胞培养上清样品中的外囊泡。
Q5 可以变更一抗吗?
A5 可以。请选择想检测的表面标记的小鼠抗体。请根据说明书研究最适浓度。
Q6 有推荐的检测一抗吗?
A6

以下抗体均为本公司通过ELISA确认的抗体

Anti CD9 for Exosome Isolation(Cosmo Bio Cat. NO.CAC-SHI-EXO-M01-50UL

Anti CD81 for Exosome IsolationCosmo Bio Cat. NO.CAC-SHI-EXO-M03-50UL)

Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13)Wako Cat. NO.012-27063

Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13)(Wako Cat. NO.016-27061

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
297-79201 PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)
PS Capture™外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)
96回用
293-77601 MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS 
MagCapture™外泌体提取试剂盒PS
10tests
299-77603 MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS 
MagCapture™外泌体提取试剂盒PS
2tests
290-35591 Magnet Stand
MagCapture系列磁珠捕获用磁力架
1个
016-27061 Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13) 
抗CD63单抗(3-13)
20ul
012-27063 Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13)  
抗CD63单抗(3-13)
100ul
CAC-SHI-EXO-M02-50UL Anti CD63 for Exosome Isolation
CD63 外泌体提取抗体
50ul
CAC-SHI-EXO-M01-100UL Anti CD9 for Exosome Isolation
外泌体分离抗体CD9
100ul
CAC-SHI-EXO-M02-100UL Anti CD63 for Exosome Isolation
外泌体分离抗体CD63
100ul
CAC-SHI-EXO-M03-100UL Anti CD81 for Exosome Isolation
外泌体分离抗体CD81
100ul
CSR-SHI-EXO-K010 ExoTrap™ Exosome Isolation Spin Column Kit, for Protein Research 
外泌体分离亲和柱套装,蛋白研究用
1kit