产品简介：

Hoechst33342也称bisBenzimideH33342或HOE33342。分子式为C27H28N6O 3HCl 3H2O，分子量为615.99，CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst33342 也用于普通的细胞核染色、DNA 染色。

Hoechst33342的最大激収波长为346nm，最大发射波长为460nm，Hoechst33342和双链DNA结合后，最大激収波长为352nm，最大収射波长为461nm。Jinpan Hoechst33342染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。

产品组成：

编号 名称	D0813	Storage
Hoechst 33342 Staining Solution	10ml	-20℃避光
使用说明书	1份

自备材料：

1、荧光显微镜

2、蒸馏水

3、微量秱液器

4、PBS 或生理盐水

操作步骤(仅供参考)：

(一)固定的组织细胞染色

1、对于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33342染色，如果丌需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst33342染色。对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积以上的Hoechst33342染色液，充分混匀。

2、室温放置 5～8min。

3、轻轻吸除Hoechst33342染色液。

4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次，每次3～5min。

5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。

(二)活细胞染色

1、取96、24、6孔板培养细胞至合适状态，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例，加入适当的Hoechst33342染色液，染液必须充分覆盖住细胞。

2、在适宜于细胞培养的条件下培养20～30min。

3、轻轻吸取Hoechst33342染色液。

4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次，每次3～5min。

5、进行荧光检测

染色结果：细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。 

注意事项：

1、Hoechst33342染色液的浓度适用于各种常规染色的需要。

2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。

3、为减缓荧光淬灭，可以使用抗荧光淬灭封片液。

4、避免反复冻融，否则容易失效。

5、Hoechst33342对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：6个月有效。