苏木素伊红(HE)染色液

苏木素伊红(HE)染色液

苏木素伊红(HE)染色液 
 
产品编号: D5806  CAS号:  
分子式:   分子量:  
EINECS编号:  
产品简介:
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色,简称 HE 染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用 HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在 HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。
Jinpan苏木素伊红染色液中,苏木素染色液采用Jinpan自主研发的配方,由进口的高纯度苏木精、氧化剂等组成,不含氧化汞、甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点是不易产生沉淀和金属;应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。
 
染色原理:
1、 细胞核染色的原理:
苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是 DNA,在 DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
2、 细胞浆染色的原理:
伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的 pH 值密切相关。当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
3、 分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在 HE 染色中常用 1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用 1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
4、 返蓝作用:
分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。
 
 
产品组成

编号
名称
D5806 D5806 Storage
试剂(A): Jinpan苏木素染色液 100ml 500ml RT避光
试剂(B):伊红染色液 100ml 500ml RT避光
使用说明书 1份 

自备材料:
1、盐酸乙醇分化液
2、蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等
3、系列乙醇
4、4%多聚甲醛
 
操作步骤(仅供参考):
(一) 石蜡切片染色
1、  切片脱蜡至水
①   二甲苯作用 2 次,每次 5~10min。
②   (可选)无水乙醇作用 2 次,每次 3~5min。                      
③   95%的乙醇                                  3~5min
④   90%的乙醇                                  3~5min
⑤   80%的乙醇                                  3~5min
⑥   自来水或蒸馏水冲洗                         1~3min
2、  染色
①   Jinpan 苏木素染色液染色                5~8min
②   自来水或蒸馏水冲洗                         5~10s
③   (可选)盐酸乙醇分化                         2~5s
④   自来水冲洗                                 20~30s
⑤   蓝化液返蓝                                 20~40s
⑥   自来水冲洗                                 30~60s
⑦   伊红染色液染色                             3~5min
⑧   自来水冲洗                                 1~5s
2、  脱水、透明、封固
①   80%乙醇                                    10~20s
②   90%乙醇                                    10~20s
③   95%乙醇作用 2 次,每次 1~2min。
④   无水乙醇作用 2 次,每次 2~3min。
⑤   二甲苯透明 3 次,每次 2~3min。
⑥   中性树脂封片。
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色;角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
(二) 冰冻切片染色
1、乙醚-乙醇混合固定液                       5~10s
2、自来水冲洗                                2~5s
3、Jinpan 苏木素染色液滴染1~2min(可加热至50℃)。
4、自来水冲洗                                2~5s
5、(可选)盐酸乙醇分化                        2~5s
6、自来水冲洗                                2~5s
7、蓝化液返蓝                                2~5s
8、自来水冲洗                                5~10s
9、伊红染色液染色                            2~5s
10、自来水冲洗                               1~2s
11、80%的乙醇                                1~2s
12、95%的乙醇                               1~2s
13、无水乙醇                                 2~5s
14、苯酚二甲苯(1:3)                          2~5s
15、二甲苯透明 3 次,每次 2~5s。
16、中性树脂封片
备选方案:
1、  无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗 2~3min.
2、  染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
(三)细胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10~20min。
2、自来水冲洗 2 次,每次 2min。
3、蒸馏水冲洗 2 次,每次 2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,作用时间应相应缩短。
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
 
注意事项:
1、  切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
2、  盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。
3、  乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。
4、  冷冻切片染色时间尽量要短。
5、  蓝化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促蓝液或 0.1~1%碳酸锂溶液。
6、  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
有效期:12个月有效。
 
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