姬姆萨染色液(Giemsa stain,1:9)

姬姆萨染色液(Giemsa stain,1:9)

姬姆萨染色液(Giemsa stain,1:9) 
 
产品编号: D8402  CAS号:  
分子式:   分子量:  
EINECS编号:  

姬姆萨染色液(Giemsa Stain,1:9)

产品简介:

姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成。Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。Jinpan Giemsa Stain以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含Jinpan特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。

Jinpan Giemsa Stain(1:9)由10×储存液和磷酸盐缓冲液组成,1:9混合成工作液后使用;亦可以分开使用,即先用Giemsa Stain染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。

 

产品组成:

                           编号

名称

D8402

100ml

D8402

500ml

Storage

试剂(A): Giemsa Stain储存液(10×)

10ml

50ml

RT避光

试剂(B): 磷酸盐缓冲液

100ml

500ml

RT

使用说明书

1份

 

自备材料:

1、 载玻片显微镜

2、 蒸馏水

3、 甲醇

4、 0.1~0.5%乙酸

 

操作步骤(仅供参考)

(一)一步法涂片染色

Giemsa工作液的配制:

按试剂(A):试剂(B)=1:9混合,即取1份Giemsa Stain储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中充分混匀,即为Giemsa工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。

常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。

将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染15~30min。

用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

干燥、镜检。

染色结果:

嗜酸性颗粒

粉红色

嗜碱性颗粒

紫蓝色

中性颗粒

淡紫色

(二)两步法涂片染色

1、 Giemsa工作液的配制:

按试剂(A):蒸馏水=1:4混合,即取1份的Giemsa Stain储存液(10×)加入到4份的蒸馏水中充分混匀,即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。

2、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。

3、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加适量Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染10~15min。

4、 加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置5~10min。

5、 用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

6、 干燥、镜检。

染色结果:

嗜酸性颗粒

粉红色

嗜碱性颗粒

紫蓝色

中性颗粒

淡紫色

(三)组织切片染色

1、 Giemsa工作液的配制:

试剂(A):试剂(B) =1:9混合,即取1份Giemsa Stain储存液(10×)加入到9份磷酸盐缓冲液中充分混匀,即为Giemsa工作液。Giemsa工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。

2、新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2天,期间应更换1次固定液。

3、3%重铬酸钾固定1天。

4、流水冲洗16个小时或过夜。

5、照常规脱水、包埋。

6、切片厚度约为5μm,常规脱蜡至水。

7、蒸馏水清洗2次,每次1min。

8、入含Giemsa工作液染缸,浸染18~24h。

9、蒸馏水稍微清洗。

 

染色结果:

细胞核

蓝色至紫色

细胞质

淡蓝色

嗜铬细胞胞质

黄绿色

结缔组织

淡红色

 

注意事项:

1.血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。

2.涂片染色中Giemsa染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。

3.如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。

4.涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。

5.染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。

6.组织切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。

7.0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片,但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止。

8.Giemsa组织切片染色中,无水乙醇脱水要迅速,否则切片易褪色。

 

有效期:24个月有效。