线粒体分离 试剂(Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells ) 

      传统的分离线粒体的方法耗时费力， 并且需要进行Dounce 匀浆，所以每次只能处理一种样品。Thermo Scientific 线粒体分离试剂盒使用的是基于试剂的非机械分离方法，不需要特殊仪器，因此可以同时处理多种样品（六种）。利用专利配方的试剂对培养的哺乳动物细胞沉淀进行温和的裂解可以得到最大量的线粒体，且将对线粒体完整性的伤害降至最小。该产品的说明书介绍了纯度/ 收率比的优化指南。该试剂盒也提供了配合使用杜恩斯匀浆的最优方法，使用该方法可以得到比单使用试剂的方法高两倍的线粒体回收率。两种方法通过差速离心分离线粒体和胞浆成分，使用台式微量离心机可以在大约40 分钟以内完成实验（收获细胞之后）。分离的线粒体可以用于细胞凋亡、信号转导、代谢研究以及线粒体蛋白组研究等后续实验。

产品特点：

• 快速 – 从2 x 107 个细胞中分离完整的线粒体仅需40 分钟( 收获细胞之后)

• 灵活 – 使用基于试剂的方法可以同时处理多个样品，配合使用Dounce 匀浆的方法可获得最大量的线粒体

• 可优化 – 说明书中提供了纯度/ 收率比的优化指南

• 简单 – 仅需台式微量离心机和微量离心管即可

• 相容性强 – 分离的线粒体可以用去垢剂进行裂解，并且与所有的后继实验完全兼容，包括2D 电泳

   

参考文献

Ambrose,M.,et al. (2006).Mol. Pharmacol.69: 1879-1890.

Barrett, L.E.,et al. (2006).Proc. Natl. Acad. Sci.USA103: 5155-5160.

Dasmahapatra, G.,et al. (2006).Mol. Pharmacol.69: 288-298.

Ju, W-J.,et al. (2007). Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.48: 2145-2151.

Samudio, I.,et al. (2005).J. Biol. Chem.280: 36273-36282.

Uo, T., Kinoshita, Y. andMorrison, R.S. (2007).J. Neurosci.27: 12198-12210.

Zhu, D.,et al. (2006). J. Neurosci.26: 11111-11119.

线粒体完整性分析。分别使用基于试剂的方法(A 和B) 和Dounce 匀浆法

（C 和D）从C6 细胞中制备线粒体和胞浆组分。利用蛋白免疫印迹分

析各组份中细胞色素C (A 和C) 以及电压依赖性离子通道(VDAC) (B 和D)。

使用的底物为用于蛋白免疫印迹的SuperSignal 皮克级化学发光底物( 产

品货号 34080)。M = 线粒体，C= 胞浆