细胞内pH测定试剂BCECF-AM

细胞内pH测定试剂BCECF-AM

细胞内pH测定试剂BCECF-AM 
 
产品编号: B262  CAS号:  
分子式:   分子量:  
EINECS编号:  

染色例:

细胞内pH测定试剂BCECF-AM

 

BCECF-AM是一种对细胞内pH敏感的新型荧光探针,分别用490 nm440 nm波长激发BCECF所得到的发射荧光之比与pH有很好的线性关系。

BCECF-AM是乙酰甲酯化的BCECFBCECF-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料,BCECF-AM没有荧光,进入细胞后被细胞内的酯酶水解成BCECF,从而被留在细胞内。BCECF在适当的pH值情况下可以被激发形成绿色荧光。

BCECF-AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究,也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF AM被广泛应用。

BCECF-AM (pH荧光探针)需用无水DMSO(anhydrous DMSO)配制

操作说明 (for Human Neutrophil)* 
试剂(溶解方法)

1 mM BCECF-AM / DMSO溶液 (1 mg BCECF-AM溶于 1.45 ml DMSO) 
HEPES
缓冲液(
20 mM HEPES153 mM NaCl5 mM KCl5 mM glucosepH 7.4

 

操作
1. 
HEPES制备细胞悬液,细胞浓度为4×107/ml
2. 
1 mMBCECF-AM / DMSO溶液加入细胞悬液中(细胞悬液的1/300体积),BCECF-AM终浓度

3 μM
3. 
37培养30分钟。
4. HEPES缓冲液清洗细胞3次,制成3×106/ml的细胞悬液。
5. 使用荧光显微镜或带有图像分析系统的激光共聚焦显微镜检测细胞的荧光强度。
*标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。

 

细胞内pH测定试剂BCECF-AM

 Cell staining with BCECF-AM 
Cell type: HeLa