硝酸还原酶（NR）活性检测试剂盒BC0085
产品名称：硝酸还原酶（NR）活性检测试剂盒
产品型号：BC0085
产品特点：硝酸还原酶（NR）活性检测试剂盒测定意义：NR（ EC 1.7.1.3）广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。
BC0085硝酸还原酶（NR）活性检测试剂盒的详细资料：
硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒
产品英文名: Micro Nitrate Reductase（NR）Assay Kit
产品货号：BC0085 产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼
产品规格：100管/48样 产品商标：Jinpan
保存与运输：4℃保存或-20℃保存； 参考价格：580
库存状态：现货
关键字: 硝酸还原酶检测试剂盒|NR检测试剂盒|硝酸还原酶|试剂盒
简要介绍：
NR广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ+NADH+H＋→NO2ˉ+NAD＋+H2O ；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对氨基ben磺酸及α-萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰，可用分光光度法测定。
产品详细描述
产品内容：
诱导剂储备液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存。临用前加入2mL提取液溶解，可分装后-20℃保存，避免反复冻融。
试剂三：液体2mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1瓶，-20℃保存。临用前加入5mL蒸馏水溶解，可分装后-20℃保存，避免反复冻融。
试剂五：液体8mL×1瓶，4℃保存。（如出现结晶析出，60 ℃水浴溶解后使用）
试剂六：液体8mL×1瓶，4℃保存。
标准品：NaNO2标准储备液1mL，10μmol/mL，-20℃保存。临用前用蒸馏水稀释0.2μmol/mL。
诱导剂应用液的配制：用时将诱导剂储备液用水稀释10倍，即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水，充分混匀。
产品说明：
NR（ EC 1.7.1.3）广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ+NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋+H2O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对–氨基ben磺酸α-萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰，可用分光光度法测定。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品测定的前处理
1、取适量诱导剂于烧杯中，将新鲜标本洗净，滤纸吸干，放入诱导剂应用液中（淹没即可），浸泡2h，取出样本，滤纸吸干后，-20℃冷冻30min，取出样本，滤纸吸干。（根据需要进行诱导处理）
2、称取约0.1g样本，加入1mL提取液，冰浴研磨，4000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长540nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在EP管中加入下列试剂）
| 试剂名称（μL） | 加样孔 | |||
| 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 | |
| 样本 | 50 | 50 | – | – |
| 标准溶液 | – | – | 50 | – |
| 双蒸水 | – | – | – | 50 |
| 试剂一 | 180 | 180 | 180 | 180 |
| 试剂二 | 20 | – | 20 | 20 |
| 混匀后，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴30min | ||||
| 试剂三 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| 试剂二 | – | 20 | – | – |
| 4000g 常温离心10min，取上清液。 | ||||
| 上清液 | 80 | 80 | 80 | 80 |
| 试剂四 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| 试剂五 | 50 | 50 | 50 | 50 |
| 试剂六 | 50 | 50 | 50 | 50 |
混匀，显色20min，520nm下比色，分别记为A测定、A对照、A标准、A空白。计算ΔA=A测定-A对照，ΔA标准=A标准-A空白
注意：空白管只需测一次。
三、NR活性计算：
（1）按样本鲜重计算：
单位定义：每小时每g鲜重样品中催化产生 1μmol NO2ˉ的量为一个 NR活力单位。
NR（U/g 鲜重）=ΔA÷（ΔA标准÷C标准）×V提取÷W÷T =0.4×ΔA÷ΔA标准÷W。
（2）按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每小时每mg组织蛋白催化产生 1μmol NO2ˉ的量为一个 NR活力单位。
NR（U/mg prot）==ΔA÷（ΔA标准÷C标准）×V样品÷（V样品×Cpr）÷T=0.4×ΔA÷ΔA标准÷Cpr。
V样品：吸取样本体积，0.05mL；V提取：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，0.5h；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；C标准：标准液浓度，0.2μmol/mL。
注意事项：
1、当测定的吸光值大于1.2或者ΔA大于0.8时，建议将上清液稀释后测定。
2、ΔA测定过小（小于0.01），可延长反应时间（水浴时间）。
相关文献：
《FIP1 Plays an Important Role in Nitrate Signaling and Regulates CIPK8 and CIPK23 Expression in Arabidopsis》 作者:Chao Wang, Wenjing Zhang, Zehui Li, Zhen Li, Yingjun Bi, Nigel M. Crawford and Yong Wang 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.716 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影响因子:4.183 PMID:30558146
《The trehalose-6-phosphate synthase TPS5 negatively regulates ABA signaling in Arabidopsis thaliana》 作者:Lianfu Tian,Zijing Xie,Changqing Lu,Xiaohua Hao,Sha Wu,Yuan Huang,Dongping Li,Liangbi Chen 期刊:Plant Cell Rep. 影响因子:3.499 PMID:30963238
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