蛋白定量试剂 BCA蛋白浓度测定试剂盒PC0020

蛋白定量试剂 BCA蛋白浓度测定试剂盒PC0020

产品名称:蛋白定量试剂 BCA蛋白浓度测定试剂盒

产品型号:PC0020

产品特点:蛋白定量试剂 BCA蛋白浓度测定试剂盒
货号 :PC0020
规格 :500 微孔(500T)
保质期 :有效期 1 年。
碱性条件下,蛋白将 Cu 2+ 还原为 Cu + , Cu + 与 BCA 试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在 562nm 处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。

PC0020蛋白定量试剂 BCA蛋白浓度测定试剂盒的详细资料:

蛋白定量试剂 BCA蛋白浓度测定试剂盒
货号 :PC0020
规格 :500 微孔(500T)
保质期 :有效期 1 年。

产品内容 :

  包装(500微孔) 保存
BCA 试剂 100ml 室温
Cu 试剂 3ml 室温
PBS 稀释液 30ml 室温
BSA 蛋白标准 (5mg/ml BSA) 1ml -20℃

产品简介 :
    碱性条件下,蛋白将Cu 2+ 还原为 Cu + , Cu + 与 BCA 试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在 562nm 处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂 SDS,Triton X-100,Tween 不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。

操作说明 :
一. 微孔酶标仪法
    1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按 50 体积 BCA 试剂加 1 体积 Cu 试剂(50:1)配制成 BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA 工作液室温 24 小时内稳定。
    2. 稀释标准品:取 10 微升 BSA 标准品用 PBS 稀释 100 微升(样品一般可用 PBS 稀释) ,使终浓度为 0.5mg/ml。将标准品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20 微升加到 96 孔板的蛋白标准品孔中,加 PBS 补足 20 微升。
    3. 将样品作适当稀释(好多做几个梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀释) ,加 20 微升到 96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。
    4. 各孔加入 200 微升 BCA 工作液,37℃放置 15-30 分钟。用酶标仪测定 A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

二. 分光光度计法
   如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。
步骤如下:
    1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按 50 体积 BCA 试剂加 1 体积 Cu 试剂(50:1)配制成 BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA 工作液室温 24 小时内稳定。
   2. 稀释标准品:取 100 微升 BSA 标准品用 PBS 稀释 1ml(样品一般可用 PBS 稀释) ,使终浓度为0.5mg/ml。
   3. 取八支(或者更多)5ml 离心管,标上号,按下表加入试剂。
    4. 37℃放置 15-30 分钟。用分光光度计测 562nm 处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

注意事项 :
    1. 长期不用时,Cu 试剂与 PBS 稀释液可置于 2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA 试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可 37℃温育使其*溶解, 不影响使用。
    2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。
    3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品 :

PC0001 BSA 标准品( 5mg/ml )
PC0021 BCA 试剂
PC0030 Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒
PC0010 Bradford 法蛋白浓度测定试剂盒
R0010  高效 RIPA 组织 / 细胞快速裂解液
R0050  核蛋白抽提试剂盒
P1300  SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒
T1070  5×Tris- 甘氨酸电泳缓冲液
PR1600  预染低分子量蛋白 Marker
P1015  4× 蛋白上样缓冲液(含 DTT )
D1060  10× 电泳转移缓冲液
PE0010 ECL Plus 荧光检测试剂 (ECL 超敏发光液 )

 

蛋白定量试剂 BCA蛋白浓度测定试剂盒

参考文献:
《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji,Panpan Zhang,Yixiao Xing,Linglu Jia,Yunpeng Zhang,Tingting Jia,Xuan Wu,Bin Zhao,Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:30365053
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影响因子:3.486 PMID:30858699