β-葡萄糖苷酶（β-GC）活性检测试剂盒BC2560

产品名称：β-葡萄糖苷酶（β-GC）活性检测试剂盒

产品型号：BC2560

产品特点：β-葡萄糖苷酶（β-GC）活性检测试剂盒
β-GC（EC 3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味；β-GC能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。

BC2560β-葡萄糖苷酶（β-GC）活性检测试剂盒的详细资料：

β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性检测试剂盒

产品名称: β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性检测试剂盒

产品英文名: β-glucosidase（β-GC） Assay Kit

产品货号：BC2560               产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格：50管/24样             产品商标：Jinpan
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：650
库存状态：现货                          
关键字: β-葡萄糖苷酶检测试剂盒|β-GC检测试剂盒|β-葡萄糖苷酶|试剂盒

简要介绍：
β-GC（EC 3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味；β-GC能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。
β-GC分解对-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基ben酚，后者在400nm有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。

产品详细描述
产品内容：
提取液：液体50ml×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10ml双蒸水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体25ml×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体80ml×1瓶，4℃保存。  
标准品：液体1ml×1支，取1.5ml EP管加入1ml，5μmol/ml的对硝基ben酚溶液。

产品说明：
β-GC（EC 3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味；β-GC能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。
β-GC分解对-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基ben酚，后者在400nm有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。

需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品的前处理：   

1. 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、标准样品的准备：取100μL标准液，加入到400μL试剂三中，得到1μmol/ml标准液，十倍稀释到100nmol/ml，倍比稀释：50、25、12.5、6.25nmol/ml，稀释液用试剂二。100、50、25、12.5、6.25nmol/ml做标准液。
二、测定步骤：

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长400nm，蒸馏水调零。
2. 加样表

β- GC 活力单位的计算： 
1、标准曲线建立：根据标准管的浓度（y）和吸光度（x），建立标准曲线。
2、根据标准曲线，将ΔA（x）带入公式计算样品产物浓度（nmol/ml）。
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在每ml每小时产生1nmol对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。
β-GC活力(U/mg prot)=(y×V反总)÷(V样×Cpr)÷T=20×y÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在每ml每小时产生1nmol对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。
β-GC活力(U/g鲜重) = (y×V反总)÷(W×V样÷V样总)÷T=20×y÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞在每ml每小时产生1nmol对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。
β-GC活力(U/10⁴ cell)=(y×V反总)÷(500×V样÷V样总)÷T=0.04×y
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；V反总：反应体系总体积，1ml；V样：加入反应体系中样本体积，0.1ml；V样总：加入提取液体积，1ml；W：样品质量，g；500：细胞或细菌总数，500万；T：反应时间，0.5h。

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