还原型谷胱甘肽（GSH）含量检测试剂盒 常量BC1170
产品名称：还原型谷胱甘肽（GSH）含量检测试剂盒 常量
产品型号：BC1170
产品特点：还原型谷胱甘肽（GSH）含量检测试剂盒 常量测定意义：GSH 是细胞内主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此，测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
BC1170还原型谷胱甘肽（GSH）含量检测试剂盒 常量的详细资料：
产品名称：还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒 常量
产品英文名： Reduced Glutathione (GSH) Assay Kit
产品货号：BC1170 产地：北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼
产品规格：50管/48样 产品商标：Jinpan
保存与运输：4℃保存或-20℃保存； 参考价格：240
库存状态：现货
关键字：还原型谷胱甘肽试剂盒|活性检测试剂盒|GSH含量检测|试剂盒
简要介绍：
GSH 是细胞内主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此，测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
DTNB 与 GSH 反应生成复合物，在 412nm 处有特征吸收峰；其吸光度与 GSH 含量成正比。
产品详细描述
产品内容：
试剂一：液体1瓶，50mL，4℃保存。
试剂二：液体1瓶，50 mL，4℃保存。
试剂三：液体1瓶，15 mL，4℃避光保存。
标准品：粉剂1支，10mg，4℃避光保存。
产品说明：
谷胱甘肽是由谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Cys）和甘氨酸（Gly）组成的天然三肽，是一种含巯基（—SH）的化合物，广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。谷胱甘肽能和5,5’-二硫代–双–（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）反应产生2-硝基-5-巯基ben甲酸和谷胱甘肽二硫化物（GSSG）。2-硝基-5-巯基ben甲酸为黄色产物，在波长412nm处具有大光吸收。
自备仪器和用品：
分析天平、微量匀浆器（规格2ml）、低温离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计，1ml比色皿。
样品的处理
1、组织处理：
新鲜组织先用PBS冲洗2次，然后称取动物组织或者植物组织0.1g。加入用试剂一润洗过的匀浆器中（匀浆器提前放冰上预冷）；然后加入1ml试剂一（组织/试剂一比例保持不变即可），迅速冰上充分研磨（使用液氮研磨效果更好）；8000g 4℃离心10min；取上清液放置于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。
2、血液处理
血浆：将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，吸取上层血浆到另一支试管中，加入等体积的试剂一, 4℃，8000g离心10分钟,将上清移入新的试管中放置于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。
血细胞：将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，弃去上层血浆用3倍体积的PBS清洗3次（用PBS重悬血细胞，600g离心10分钟），加入等体积试剂一，混匀后4℃放置10分钟，8000g离心10分钟，吸取上清放于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。
3、细胞处理
收集不少于106个细胞，先用PBS清洗细胞2次（PBS重悬细胞，600g离心10分钟），加入3倍细胞沉淀体积的试剂一重悬细胞，反复冻融2-3次（可在液氮中冻结，37℃水浴中溶解），8000g离心10分钟，收集上清于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。
操作步骤
- 分光光度计预热30min以上，分光光度计调节波长412nm，蒸馏水调零。
- 试剂二放置37℃（哺乳动物）或25℃（一般物种）水浴中保温30min。
- 空白管检测：取1ml比色皿，依次加入100μL蒸馏水，700μL试剂二，200μL试剂三，混匀，放置2min后测定412nm吸光度A1。
- 制作标准曲线
称1mg标准品用1ml蒸馏水溶解，浓度为1mg/ml。取适当溶液配制浓度为200μg/ml、100μg/ml、50μg/ml、25μg/ml、12.5μg/ml的标准品（试剂一十倍稀释后进行稀释）。
取1.5mlEP管依次加入100μL标准品，700μL试剂二，200μL试剂三，每管混匀后静置2min，检测412nm处吸光度，吸光度减去空白孔（A1）为横坐标，根据吸光度（x）和浓度（y，μg/ml）做出标准曲线。
- 样品管测定：取1ml比色皿，依次加入100μL样品，700μL试剂二，200μL试剂三，混匀后静置2min检测412nm处吸光度A2，△A= A2– A1。
GSH含量计算
根据标准曲线，将样品△A带入公式中（x），计算出样品浓度y（μg/ml）。
（1）按蛋白浓度计算
GSH（μg / mg prot）=y×V 反总÷V 样÷Cpr =y×10÷Cpr
（2）按样本质量计算
GSH（μg /g）= y×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)= y×10 ÷W
（3）按细胞数量计算
GSH（μg /104 cell）= y×V 反总÷(V 样÷V 样总×细胞数量)= y×10 ÷细胞数量
（4）按液体体积计算
GSH（μg / mL）= y×V 反总÷V 样= y×10
V 反总：反应总体积，1mL；V 样总：上清液总体积，1 mL；V 样：加入反应体系中上清液体积，100μL=0.1 mL；W：样品质量，g ；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL。
注意事项：
- 样品处理需匀浆*，若当天不能完成测量，可放-80℃保存。
- 标准品：还原型谷胱甘肽现配现用。
- 若不确定样品中GSH含量的高低，可稀释几个梯度后再进行测量。
- 因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂，因此上清液不能用于蛋白浓度测定。
相关文献:
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还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒 常量