总巯基含量检测试剂盒BC1375

总巯基含量检测试剂盒BC1375

产品名称:总巯基含量检测试剂盒

产品型号:BC1375

产品特点:总巯基含量检测试剂盒
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。

BC1375总巯基含量检测试剂盒的详细资料:

总巯基含量检测试剂盒

生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质,而且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和 GSH 含量,能够间接测定蛋白质巯基含量。

巯基基团与 5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在 412nm 处有吸收峰。

总巯基含量检测试剂盒

样品的制备:

1. 按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 8000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2. 血清,培养液:直接测定。

操作步骤:

1、 分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长 412nm,蒸馏水调零。

2、操作表对照管 测定管样品(μL) 40 40 试剂一(μL) 150 150 试剂二(μL) 10 H2O(μL) 10 混匀,25℃静置 10min,于微量石英比色皿/96 孔板,测定 412nm 吸光值。ΔA=A 测定-A 对照。

计算公式:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下总巯基标准曲线:y = 1.7236 x,R 2 = 0.9994

1. 组织:

(1)按样本重量计算总巯基含量(μmol/g)= 1.7236 A ×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)= 2.9×ΔA÷W

(2)按样本蛋白浓度计算总巯基含量(μmol/mg prot)= 1.7236 A ×V 反总÷(V 样×Cpr) = 2.9×ΔA÷Cpr

2. 血清、培养液:

总巯基含量(μmol/L)= 1.7236 A ×V 反总÷V 样×103 =2900×ΔA V 反总:反应总体积,0.2mL;V 样:反应中样品体积,0.04mL;V 样总:加入提取液体积, 1mL;W:样品质量,g ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;103 :1mmol/L=103 μmol/ L

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

总巯基标准曲线:y = 0.8618x,R 2 = 0.9994 1.

组织:(1)按样本重量计算总巯基含量(μmol/g)= 0.8618 A ×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)=5.8×ΔA÷W

(2)按样本蛋白浓度计算总巯基含量(μmol/mg prot)= 0.8618 A ×V 反总÷(V 样×Cpr)=5.8×ΔA÷Cpr

2. 血清、培养液:总巯基含量(μmol/L)= 0.8618 A ×V 反总÷V 样×103 =5800×ΔA V 反总:反应总体积,0.2mL;V 样:反应中样品体积,0.04mL;V 样总:加入提取液体积, 1mL;W:样品质量,g ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;103 :1mmol/ L=103 μmol/ L