植物中脂氧合酶 (LOX)活性检测试剂盒BC0325

植物中脂氧合酶 (LOX)活性检测试剂盒BC0325

产品名称:植物中脂氧合酶 (LOX)活性检测试剂盒

产品型号:BC0325

产品特点:植物中脂氧合酶 (LOX)活性检测试剂盒
测定意义:LOX广泛存在于植物组织中,催化不饱和脂肪酸氧化反应,导致膜脂过氧化。在植物的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。
测定原理:LOX催化亚油酸氧化,氧化产物在234nm处有特征吸收峰;测定234nm吸光度增加速率,来计算LOX活性。

BC0325植物中脂氧合酶 (LOX)活性检测试剂盒的详细资料:

植物中脂氧合酶 (LOX)活性检测试剂盒

LOX 广泛存在于植物组织中,催化不饱和脂肪酸氧化反应,导致膜脂过氧化。在植物的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。 LOX 催化亚油酸氧化,氧化产物在 234nm 处有特征吸收峰;测定 234nm 吸光度增加速率,来计算 LOX 活性。

植物中脂氧合酶 (LOX)活性检测试剂盒

一、粗酶液提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心 20min,取上清置冰上待测。二、测定: 1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长到 234 nm,蒸馏水调零。 2. 试剂二在 25℃水浴中预热 30 min 以上。 3. 空白管:依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 蒸馏水、160μL 试剂二和 20μL 试剂三,迅速混匀后于 234nm 比色,记录 15s 和 75s 的吸光值,分别记为 A1 和 A2。 4. 测定管:依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 上清液、160μL 试剂二和 20μL 试剂三,迅速混匀后于 234nm 比色,记录 15s 和 75s 的吸光值,分别记为 A3 和 A4。三、LOX 活性计算: a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下(1) 按照蛋白浓度计算活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化 0.001 个单位为 1 个酶活单位。 LOX (U/mg prot) = [(A4-A3)-(A2-A1)]×V 反总÷(Cpr×V 样)÷T×1000 = 10000×[(A4-A3)-(A2-A1)]÷Cpr Jinpan