TBD 大鼠外周血单核细胞分离液试剂盒P9230

TBD 大鼠外周血单核细胞分离液试剂盒P9230

产品名称:TBD 大鼠外周血单核细胞分离液试剂盒

产品型号:P9230

产品特点:贮藏及保存期限 6. 贮藏及保存期限

18℃-25℃避光保存,有效期两年。启封后置 4℃保存,有效期一周。

注:若保证无微生物污染,启封后可置 4℃长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易

出现白色结晶,影响分离效果。

P9230TBD 大鼠外周血单核细胞分离液试剂盒的详细资料:

A 本分离液是敏光型的,在运输和贮藏过程中应在 18-25避光保存,启封后置 4

℃保存避免微生物污染。另外,本品为真空包装,未启封前置于 10 以下易出现白色结晶,

影响分离效果。

B 待分离的血液、组织及细胞要求新鲜,避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一

定在20水浴箱中复温20分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2时分离效果,

且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。

C 由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响

分离效果,用户可以调节离心转数,调节离心的时间,摸索佳的分离条件(具体分离条件

各实验室自定)。

D 使用无静电反应的离心管,推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。

E 优抗凝剂选择:EDTA、枸橼酸、肝素。应注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂

体积。

F 分离过程中所用其他试剂如:羟乙已基淀粉 550、全血及组织稀释液、细胞洗涤液及红细

胞裂解液等以我公司产品为优选择,本公司相关系列产品无菌、无病毒、无支原体、低内

毒素水平且无细胞毒性,所获得的细胞可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。

4. 

适用于从动物血液或脏器组织中分离单核细胞。

5.. . . 产品性能指标

pH 7.0-7.5

渗透压 280-340mOsmol/kg

内毒素 0.5…EU/ml

无菌 直接接种培养 14 天后培养基澄清

澄明度及不溶性颗粒物  50ml 溶液中含 10μ以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下,,,

 25μ以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下

6.

7. 实验前准备 7. 实验前准备

A 试剂

单核细胞分离液试剂盒所含试剂、组织匀浆液、羟乙已基淀粉 550、胎牛血清

B 器材

玻璃离心管、玻璃滴管

水平转子离心机、无菌工作台

8. 各种动物 8. 各种动物单核细胞分离液试剂盒使用方法说明及图例

A.  10ml  15ml 玻璃离心管中依次小心加入 A两种液体各 2ml,制成梯度界面(各液面分层一定要清晰);

B  1ml新鲜抗凝血按11比例与全血及组织稀释液混匀并小心叠加于D液之液面上;或将组织单细胞悬液(细胞浓度为2×108

-1×109/ml,制备方法详见“10.组织单细胞悬液的制备方法”)叠加于D液之液面上;

C. 400g(约1500/分)离心15分钟(半径15cm水平转子)

此时离心管中由上下细胞分为六层。*层;为血浆(稀释液)层。第二层;;;为;单核

细胞层。。。第三层;为透明 D 液层。第四层;为淋巴细胞层。第五层;为透明 A 液层。第六层;

为极少量红细胞层。收集第二层单核细胞放入含 4-5ml 细胞洗涤液的试管中,充分混匀后,

 500g(约 1800 /分)离心 20 分钟,弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤 2 次即得所需单核细胞。

注::A. 提取率约为 80%