普鲁士蓝染色试剂盒(伊红法)G1424

普鲁士蓝染色试剂盒(伊红法)G1424

产品名称:普鲁士蓝染色试剂盒(伊红法)

产品型号:G1424

产品特点:普鲁士蓝染色试剂盒(伊红法)
含铁血黄素(hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁、金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

G1424普鲁士蓝染色试剂盒(伊红法)的详细资料:

普鲁士蓝染色试剂盒(伊红法)

产品简介:

含铁血黄素(hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁、金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,常见于吞噬细胞内或间质内,主要显示三价盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,:常用于显示局部组织内的各种出血性病变,常见于吞噬细胞内。

在判断含铁血黄素沉积时,用Perls反应可以得到证实, 该染色法可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广,可以进行复染。 其复染液采用伊红染色液,也是常用的复染液,该复染液染色时间较核固红染色液要短。

普鲁士蓝染色试剂盒(伊红法) 

操作步骤(仅供参考):

(一)石蜡切片染色

1、 切片脱蜡水 ① 二甲苯(Ⅰ) 5~10min ② 二甲苯(Ⅱ) 5~10min ③无水乙醇(Ⅰ)(可选) 3~5min ④无水乙醇(Ⅱ)(可选) 3~5min ⑤95%的乙醇 3~5min ⑥90%的乙醇 3~5min ⑦80%的乙醇 3~5min ⑧自来水或蒸馏水冲洗(Ⅰ) 1~3min ⑨自来水或蒸馏水冲洗(Ⅱ) 1~3min

2、染色 ①切片入 Perls stain(见注意事项 6) 15~30min ②蒸馏水充分冲洗 5~10min ③伊红染色液淡染细胞核 15~30s ④自来水冲洗 1~5s。

3、脱水、透明、封固 ①90%乙醇 10~20s ②95%乙醇(Ⅰ) 1~2min ③95%乙醇(Ⅱ) 1~2min ④ 无水乙醇(Ⅰ) 2~3min ⑤无水乙醇(Ⅱ) 2~3min ⑥ 二甲苯(Ⅰ) 2~3min ⑦二甲苯(Ⅱ) 2~3min ⑧ 二甲苯(Ⅲ) 2~3min ⑨中性树脂封片。

(二)冰冻切片染色

1、 无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗 2~3min。

2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。

(三)细胞染色

1、4%多聚甲醛固定 10~20min。

2、自来水冲洗 2 次,每次 2min。

3、蒸馏水冲洗 2 次,每次 2min。

4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。

染色结果:含铁血黄素或三价铁 蓝色细胞核、其他组织 红色阴性对照(可选)取相同连续切片脱蜡水。置于 5%的草酸中,孵育 2-6h 后,经 Perla stain,需要步骤同上。结果为阴性。

注意事项: 1、 切片脱蜡应尽量干净。 2、 组织固定常采用 10%的中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。 3、 临用前取 A1、A2 液等量混合,即为试剂(A),现配现用,不可提前配制。 4、整个操作过程中容器要干净,避免使用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普通水内含铁质。 5、避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。 6、Perls stain 染色时,应根据样品情况调整着色时间。 7、所有检查切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要.尸检肺组织是一个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞). 8、95%乙醇、90%乙醇应经常更换新液. 9、 冰冻切片和细胞的染色,应根据具体情况摸索实验条件. 10、 为了您的健康和安全,请穿实验服并戴一次性手套操作.