质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase
货号：125-05061
包装：20ug x5
包装：20ug x5
质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase
赖氨酰肽链内切酶（Lysyl Endopeptidase）可以特异性剪切除赖氨酸残基C末端和S-氨乙基半胱氨酸残基的肽键，用于蛋白测序和Lys-X 化合物的酶催化合成。该酶（#125-05061）稳定性高，在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30度孵育6小时之后，仍然拥有完整的生物活性。
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质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase
赖氨酰肽链内切酶（Lysyl Endopeptidase）最初由Masaki等人从土壤细菌中分离得到。该酶可以特异性剪切除赖氨酸残基C末端和S-氨乙基半胱氨酸残基的肽键，用于蛋白测序和Lys-X 化合物的酶催化合成。作为Wako官方授权分销商，金畔生物专业提供Wako多种级别赖氨酰肽链内切酶，该酶稳定性高，在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30℃孵育6小时之后，仍然拥有完整的生物活性。订购热线：021-50837765
质谱级赖氨酰肽链内切酶是质谱分析前处理时最常用的蛋白分解酶。若同时使用赖氨酰肽链内切酶和胰酶，可更好地切断赖氨酸基团的多肽，增加多肽的数量。产品已按照使用习惯做成小包装，是方便使用的冷冻干燥品。
质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 理化特性
表1赖氨酰肽链内切酶理化特性表
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外观
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冻干粉（包含2 mmol/L Tris-HCl buffer，pH 8）
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活性
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0.03~0.07AU/vial
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分子量
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27,000（凝胶过滤）；30,000 (SDS-PAGE)
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溶解性
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易溶于水或缓冲液
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最佳pH
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9.0-9.5（酰胺酶的最佳活性pH）
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等电点
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6.9-7.0
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抑制剂
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DFP、PMSF、TLCK
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来源
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细菌
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稳定性
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溶于pH 值5.0-12.0 的Tris缓冲液中，可于4℃稳定保存2年。溶于pH 值6.0-11.0 的缓冲液中，可于30℃稳定保存，但是50℃及以上不稳定。
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单位定义
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一单位酰胺酶(AU) 指在30℃ pH 9.5 时每分钟产生1 μmol 对硝基苯胺所需的酶量。
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底物特异性
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水解底物：Tos-Lys-Ome、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
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非水解底物：Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNa、Arg-pNA
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质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 产品特点
- 高特异性、高蛋白质消化率、适用于蛋白质谱分析
- 提高裂解效率、增加肽段数量
- 根据使用量特意制备小包装，方便使用
质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 应用实例
分别采用胰蛋白酶(Tp)、赖氨酰肽链内切酶(Lep) 和Tp 与Lep联用进行胶内酶切的效果比较：牛血清蛋白BSA 的条带(100ng) 通过SDS-PAGE 获得，然后分别用Tp、Lep 和Lep+Tp 进行酶切，再用MALDI-TOFMS 法进行分析。蛋白酶的实验效果如下表：
表2 Tp、Lep 和 Lep+Tp 的蛋白酶酶切结果对照
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Tp
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Lep
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Lep +Tp
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裂解位点
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精氨酸和赖氨酸的C端
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赖氨酸的C端
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精氨酸和赖氨酸的C端
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错误裂解率
(错误裂解所占比例) |
多(8%)
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很少(0%)
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少(3%)
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鉴定出的多肽数量
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17
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19
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22
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结果表明 Lep 酶解的错误裂解率最低，Tp酶解时加入Lep后，错误裂解率有所降低，同时，可以鉴定出更多的多肽。
图1 胰蛋白酶 (Tp)(图 a) 和赖氨酰肽链内切酶 (Lep)+Tp (图 b) 酶切后的质谱结果对照图。
Lep+Tp酶切后，可以在m/z=2000时得到吸收峰，而单独的Tp酶切在m/z=2000时没有吸收峰。该结果表明Lep可以提高测序覆盖度。
( 数据由大阪医疗中心和妇婴健康研究所Y. Wada博士提供 )
质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 产品列表
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品牌
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产品编号
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产品名称
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产品规格
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产品等级
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Wako
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125-05061
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Lysyl Endopeptidase, MS Grade
赖氨酰肽链内切酶，MS级 |
20μgx5
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质谱级
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Wako
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125-02543
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Lysyl Endopeptidase (R)
赖氨酰肽链内切酶 |
1vial(2AU)
|
for Biochemistry
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|
Wako
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129-02541
|
Lysyl Endopeptidase (R)
赖氨酰肽链内切酶 |
1vial(10AU)
|
for Biochemistry
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质谱级 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 参考文献
- Wada, Y., and Kadoya, M.: J. Mass Spectrom., 38, 117 (2003).
- Shevchenko, A., Wilm, MM., Vorm, O., and Mann., M.: Anal. Chem., 68, 850 (1996).
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