DNA电泳试剂 DNAGREEN 核酸染料G7140

DNA电泳试剂 DNAGREEN 核酸染料G7140

产品名称:DNA电泳试剂 DNAGREEN 核酸染料

产品型号:G7140

产品特点:DNA电泳试剂 DNAGREEN 核酸染料
货号 :G7140
规格:0.5ml (10000×)
保存:常温运输,4℃保存,有效期一年。
注意 :本产品属于微量核酸检测试剂,使用时请按照说明书操作。

G7140DNA电泳试剂 DNAGREEN 核酸染料的详细资料:

DNA电泳试剂 DNAGREEN  核酸染料

货号 :G7140

规格:0.5ml (10000×)

保存:常温运输,4℃保存,有效期一年。

注意 :本产品属于微量核酸检测试剂,使用时请按照说明书操作。

 

产品简介 :

目前常见的替代 EB 的核酸染料 SYBR Green I (属于花氰类染料) 虽然毒性比 EB 低、 灵敏度比 EB 高,但由于其化学稳定性差;此外,SYBR Green I 在电泳过程中能在 DNA 分子间移位,很容易使 DNA 条带模糊和扭曲,电泳清晰度和分辨率下降。所以在实际应用中依然不能有效替代 EB。本产品是同时具有 EB 稳定性和 SYBR Green I 低毒性的新性核酸染料,其特点如下:

1.  低毒。其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。

2.  灵敏。检测灵敏度跟 EB 相当,能满足常规核酸电泳实验要求。

3.  稳定。对光、水和热的稳定性跟 EB 相当,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。

4.  无分子间位移现象。不会出现 SYBR 染料常见的条带模糊和扭曲现象。

5.  使用方法多样。既可以加入熔化的胶中,也可以电泳后染色,还可用于 PAGE。

6.  跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如 SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容,但在 SuperBuffer-2 和 TBE 中背景低。

7.  观察时不需要任何额外的仪器设备或 UV 光源,可以使用现成的观察 EB 的 300nm UV。

8.  可用于 RNA 染色(也呈绿色)。

9.  DNA 或 RNA 浓度较高时还可以直接在日光下观察 (需要将胶放在黑色背景下) 。 由于避免了 UV 对 DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。

 

使用方法:

电泳中染色:

本方法是将 DNAGREEN 直接加入溶化的凝胶中使用,只适用于琼脂糖凝胶电泳,不适用于 PAGE。

1.  将 DNAGREEN 直接加入到融化的琼脂糖凝胶中, 每 100mL 凝胶加 310 uL DNAGREEN, 混合均匀后倒胶。琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料(如 EB 和 SYBR Green I,否则会相互干扰) 。在 100mL 琼脂糖凝胶中加入 DNAGREEN 的量不要超过 10 uL,否则背景增强。注意:一定要保证琼脂糖*熔化,尤其是在*次熔化胶的时候,否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光。

2.  将 DNA 样品与 DNA 上样液按比例混合后上样。注意:一定要使用不含 SDS 等去污剂的上样液,否则SDS 会跟染料结合,极大地降低灵敏度。

3.  上样后电泳,电泳参数同常规的电泳。

4.  电泳结束后在 300 nm 左右 的 UV 下观察。

注意:不要使用波长为 260 nm 或 360 nm 的 UV,否则检测灵敏度会降低。如果 DNA 或 RNA 浓度较高,还可以直接在日光下直接观察(需要将胶放在黑色背景下) ,

避免 UV 对 DNA 的伤害,尤其适用于胶回收实验。

5.  用配置了 520-550 nm 滤光片(一般呈黄色或深黄色)的相机拍照。注意:不要使用与 EB 兼容的红色滤光片(它能阻挡 520-550 nm 的光) 。如果能再加上能滤去 UV 的滤光片,效果会更好。

6.  后续 Southern、转膜或 DNA 胶回收实验按常规操作进行。

 

电泳后染色:

本方法是在电泳后对 DNA 进行染色,适用于琼脂糖凝胶电泳和 PAGE。但该方法需要单独的染色处理,染料用量较大,不推荐用于琼脂糖凝胶的染色。

1.  按照常规方法进行电泳。

2.  用去离子水将 DNAGREEN 稀释 500 倍后(100 mL 水需要加 0.2 mL DNAGREEN) ,将凝胶放入,室温下摇晃染色 30 分钟(对琼脂糖凝胶)或 15 分钟(对 PAGE) 。

3.  用水脱色 10-30 分钟,具体时间需根据背景强弱决定。

注意:电泳后染色液可以反复使用次数。

 

疑难解答: 

Q:本产品可否用于 RNA 染色?

A: 可以,不论 RNA 是在甲醛变性胶中电泳,还是在普通的 SuperBuffer-2、TBE 或 TAE 胶中电泳,RNA染色后在 300nm 下都跟 DNA 一样呈绿色,

Q:本产品是否可以加入上样液中进行染色?

A:不行,本产品只能直接加入凝胶中进行染色或电泳后再染色。

Q:为何前端(靠近正极)的 DNA 条带很淡或根本看不见?

A:跟 EB 一样,电泳时 DNAGREEN 朝负极方向移动,当前端的 DNA(小片段)进入没有 DNAGREEN的区域时,已经结合的染料分子会逐渐从 DNA 分子上脱落,所以条带会变淡或根本看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色;之二是在每 100 mL 电泳缓冲液中补加 3-5uL 染料。

Q:本产品在哪种缓冲液中效果好?

A:DNAGREEN 染料在不同缓冲液中背景荧光强度不同,从弱到强的顺序是:SuperBuffer-2、TBE、TAE。

在背景较强的缓冲液体中,可以适当降低染料的用量,比如 100mL 胶中加 3-5 uL。浓度需要稍做摸索。

Q:用 SYBR 染色的 DNA 在电泳时为何容易发生条带模糊和扭曲现象?

A:SYBR 染料一般与 DNA 的小沟结合,但在常规电泳条件下该结合并不牢固,染料分子可以在标记的和未

标记的 DNA 分子之间转移,使 DNA 分子的泳动速度时快(无染料结合时)时慢(有染料结合时) ,发生条带模糊和扭曲现象。嵌入型染料(如 EB 和本产品)与 DNA 结合牢固,则无此现象。

 

相关产品 :

T1050 5×TBE  缓冲液

T1060 50×TAE  缓冲液

E1020 EB 溶液 (10mg/ml)

A1020 40% 丙烯酰胺( 19:1 )

D1010 6×DNA Lodding Buffer

M1060  D2000 DNA Ladder

PC1120 2×Taq PCR MasterMix ( 含染料)

 

DNA电泳试剂 DNAGREEN  核酸染料订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

DNA电泳试剂 DNAGREEN  核酸染料运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入金畔生物的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装金畔生物冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入金畔生物的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。