钙盐染色液(Von Kossa硝酸银法)

钙盐染色液(Von Kossa硝酸银法)

钙盐染色液(Von Kossa硝酸银法) 
 
产品编号: D6203  CAS号:  
分子式:   分子量:  
EINECS编号:  

产品简介:

钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。钙在机体内以两种形式存在,一种是离子钙,存在血液循环内,即所谓血钙;另一种是结合钙,和蛋白、碳酸或磷酸结合而沉着在组织内。除骨骼和牙齿外,正常时钙渗透在所有组织和细胞中,一般不以固体状态出现在组织内。但在某些情冴下,钙析出成固体并沉着于组织内,则为病理性钙盐沉着。沉着的钙盐主要是磷酸钙,其次为碳酸钙。钙盐通常是单折射的,但草酸钙是双折射的。当使用 HE 染色时,钙一般呈紫蓝色。许多染料可以于钙形成螯合物,包括茜素红 S、红紫素、核固红等。茜素红 S 属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能不碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。

钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红 S 法, 钙盐染色液采用 Von Kossa 硝酸银法,其原理在于该法是一种金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。 

产品组成

编号

名称

D6203

2×50ml

Storage

试剂(A): Von Kossa 硝酸银溶液

50ml

RT避光

试剂(B):  海波溶液

50ml

RT

试剂(C): Von Kossa 对照液

10ml

RT

使用说明书

1 份

自备材料:

110%中性福尔马林固定液

2、系列乙醇

3、蒸馏水

4、显微镜

操作步骤(仅供参考)

1、组织固定于 10%中性福尔马林,常规脱水包埋。

2、切片厚度 5μ m,常规脱蜡至水。

3、蒸馏水洗 1min。

4、切片入 Von Kossa 硝酸银溶液,强光照射 15~60min(见注意事项 2)。

5、蒸馏水洗 1min。

6、入海波溶液处理 2min。

7、HE 染色液或 Van Gieson 复染细胞核。

8、常规脱水透明,中性树胶封固 

染色结果:

钙盐  

黑褐色至深黑色

细胞核

根据复染液不同而不同

背景

红色

阴性对照:

1、如有必要,可做阴性对照。取另外一张连续切片脱蜡至水,置于 Von Kossa 对照液处理20min,流水冲洗 5min。不试验片一同入 Von Kossa 硝酸银溶液,余下步骤同上,结果为阴性。

注意事项:

1、钙盐组织固定以中性福尔马林为佳,不宜采用 Bouin 液等酸性固定液和甲醛钙固定液。如用常规的 10%福尔马林固定,固定 46h 后即可进行脱水包埋,以防止固定液酸化导致钙盐溶解。

2、作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间。如暴露于强光下,15min 已经足够;如暴露于紫外灯下,10min 即可;如暴露于一般光线下,宜适当延长曝光时间。

3、该染色法可以区分尿酸盐和钙盐,其原理在于钙盐不溶解于碳酸锂溶液,尿酸盐易溶解于碳酸锂溶液,切片经碳酸锂处理后,入硝酸银溶液并置于强光下,尿酸盐呈阴性反应。

4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效。

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