羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒BC0250

羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒BC0250

产品名称:羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒

产品型号:BC0250

产品特点:羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒
测定意义:HYP是机体胶原蛋白主要成分之一,胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等,因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。
测定原理:样品经水解产生游离的HYP,进一补被氯胺T氧化,氧化产物与对二甲氨基苯jia醛反应,产生红色化合物,在560nm处有特征吸收峰。通过测定样品水解液560nm吸光值,可计算HYP含量。

BC0250羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒的详细资料:

羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒

HYP 是机体胶原蛋白主要成分之一,胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等,因此 HYP 含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。样品经水解产生游离的 HYP,进一补被氯胺 T 氧化,氧化产物与对二甲氨基苯jia醛反应,产生红色化合物,在 560nm 处有特征吸收峰。通过测定样品水解液 560nm 吸光值,可计算 HYP 含量。

 

一、羟脯氨酸提取: 1. 组织:取约 0.5g 样品于玻璃管,加入 5mL 的组提取液,置于 110℃烘箱,水解 6 12 小时,16000rpm,25℃,离心 20min,用提取液定容 5mL,取上清待测。 2. 细胞:取约 500 万个细胞,加入 2mL 的细胞提取液,于高压消毒器中 15 磅保持 30min,自然降压后待测。二、测定操作:对照管 测定管样本(mL) 0.2 试剂一(mL) 0.2 0.2 混匀,室温静置 20min 试剂二(mL) 0.2 0.2 H2O(mL) 0.6 0.4 混匀,60℃,20min,取出后室温静置 15 min,测定 A560。(A560=A 测定-A 对照) 羟脯氨酸含量计算:标准曲线:y=64.875x+ 0.0251,R 2=0.9991 (1)按组织计算 HYP 含量(mg/g) =(A560-0.0251)÷64.875×V 反总÷(V 样÷V 样总×W) =0.385×(A560-0.0251)÷W (3)按细胞计算: HYP 含量(mg/10 4cell)= (A560-0.0251)÷64.875×V 反总÷V 样×V 样总÷细胞数量(万个) =0.154×(A560-0.0251)÷细胞数量(万个) V 反总:反应体系总体积,1mL; V 样:反应中样本体积,0.2mL;V 样总:加入提取液体积,mL; W:样本质量,g。

羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒

组织提取液:6mol/L 盐酸,自备。浓盐酸:H2O(V/V)= 1:1,室温保存;细胞提取液:液体 100mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂一:液体 10mL×1 瓶,4 ℃避光保存;试剂二:液体 10mL×1 瓶,4 ℃避光保存。

 相关文献:

《Enhancement of the chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells and cartilage repair by ghrelin》 作者:Litong Fan  Jiaqing Chen  Yanmeng Tao  Boon Chin Heng  Jiakuo Yu  Zheng Yang  Zigang Ge 期刊:Wiley Online Library 影响因子: PMID:30644571