D2810 DNA退火缓冲液

D2810 DNA退火缓冲液

产品名称:D2810 DNA退火缓冲液

产品型号:

产品特点:D2810 DNA退火缓冲液
保存条件:
-20℃保存,一年有效。

D2810 DNA退火缓冲液的详细资料:

D2810 DNA退火缓冲液

把要退火的DNA oligo用经灭菌的三蒸水配制成50μM。解冻Annealing Buffer for DNA Oligos(5X),混匀备用。如经常使用,本Buffer可放置2-8℃一个月。
2. 如下设置退火反应体系:

Annealing Buffer for DNA Oligos(5X) 20μl
DNA oligo A(50μM) 20μl
DNA oligo B(50μM) 20μl
Nuclease-Free Water 40μl
总体积 100μl

按照上述顺序依次加入各种试剂,混匀。放入PCR仪。
3. 如下设置PCR仪进行退火反应:

步骤 温度 时间 说明
1 95℃ 2分钟 让oligo充分变性
2 每8秒下降0.1℃,降25℃(注1) 约90分钟 退火
3 4℃ 长时间保持 暂时存放

注1:如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能,也可以设置为每90秒下降1℃。
4. 退火结束后可以直接用于连接反应,也可以在-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应,好用纯化试剂盒进行纯化,或者确保退火产物在反应体系中体积不超过10%,以避免AnnealingBuffer对后续的酶反应体系的干扰。