ADPG焦磷酸化酶（AGP）活性检测试剂盒BC0430

产品名称：ADPG焦磷酸化酶（AGP）活性检测试剂盒

产品型号：BC0430

产品特点：ADPG焦磷酸化酶（AGP）活性检测试剂盒
测定意义：AGP催化葡萄糖-1-磷酸与ATP反应生成淀粉合成的直接前体ADPG，是植物淀粉生物合成的主要限速步骤。
测定原理：AGP催化的逆向反应生成G1P，在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，340nm下测定NADPH增加速率，即可计算AGP活性。

BC0430ADPG焦磷酸化酶（AGP）活性检测试剂盒的详细资料：

ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒

操作步骤：

1,分光光度计预热 30min,调节波长到 340nm,蒸馏水调零。并将试剂一置 30℃保温 10min 以上。

2，在离心管中按顺序加入以下试剂：测定管试剂一（μL） 100 试剂二（μL） 10 试剂三（μL） 50 试剂四（μL） 100 样本（μL） 20 混匀，30℃保温 15 min，置沸水浴中 1 min，冰浴迅速冷却试剂一（μL） 300 试剂五（μL） 100 试剂六（μL） 10 试剂七（μL） 10 混匀后立即在 340 nm 波长下记录初始吸光度 A1 和 2min 后的吸光度 A2，计算ΔA=A2-A1。

ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒

AGP 活性计算：

1、按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活性单位。 AGP（U/mg prot）＝[ΔA×V 反总÷(ε×d)×10 9] ÷（V 样×Cpr）÷T=2813×ΔA÷Cpr。此法需要自行测定粗酶液蛋白质浓度。

2、按照样本鲜重计算单位的定义：每 g 组织在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。 AGP 活性（U/g mass）=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×10 9] ÷（W×V 样÷V 样总）÷T=2813×ΔA÷W

V 反总：反应体系总体积，7×10 -4 L；ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×10 3mol/L/cm；V 样：加入样本体积，0.02 mL；

V 样总：加入提取液体积，1 mL；d:比色皿光径 1cm。Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL。W：样品质量，g。T:反应时间 2min。

ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒

提取液：液体 30mL×1 瓶，4℃保存; 试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1 支，4℃保存；临用前每支加入 250μL 双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂仍 4℃保存；试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 2mL 双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂仍 4℃保存；试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用每瓶前加入 3mL 双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂仍 4℃保存；试剂五：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 3mL 双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存；试剂六：粉剂×1 支，-20℃保存；临用前每支加入 250μL 双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂 4℃保存；试剂七：粉剂×1 支，-20℃保存；临用前每支加入 250μL 双蒸水充分溶解备用；用不完的试剂 4℃保存；